|
Стр. 1
УТВЕРЖДЕНО
Постановлением
Госкомсанэпиднадзора России
от 4 мая 1994 г. N 011
Дата введения -
с момента опубликования
1.2. ЭПИДЕМИОЛОГИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ РАБОТЫ С МИКРООРГАНИЗМАМИ
I-II ГРУПП ПАТОГЕННОСТИ
SAFETY WORK WITH MICROORGANISMS OF
I-II GROUPS OF PATHOGENICITY
САНИТАРНЫЕ ПРАВИЛА И НОРМЫ
СП 1.2.011-94
1. Разработаны:
- Госкомсанэпиднадзором России (Федеров Ю.М.)
- Противочумным центром Госкомсанэпиднадзора России
(Пономарева Т.Н., Королев Ю.С., Кюрегян А.А., Головченко Н.Н.,
Безсмертный В.Е.)
- Российским научно-исследовательским противочумным институтом
"Микроб" (Кокушкин А.М., Попов Ю.А., Васенин А.С.)
- Научно-исследовательским институтом профилактической
токсикологии и дезинфекции (Пантелеева Л.Г., Арефьева Л.И.,
Соколова Н.Ф., Потемкин А.С., Рамкова Н.В.)
- Иркутским научно-исследовательским противочумным институтом
Сибири и Дальнего Востока (Захлебная О.Д.)
- Ставропольским научно-исследовательским противочумным
институтом Кавказа и Закавказья (Юндин Е.В.)
- Волгоградским научно-исследовательским противочумным
институтом (Липницкий А.В., Лесовой В.С.)
- Ростовским научно-исследовательским противочумным институтом
(Анисимов Б.И.)
- Институтом вирусологии им. Д.И.Ивановского (Львов Д.К.,
Гайдамович С.Я., Фадеева Л.Л., Дерябин П.Г., Буденко А.М., Терских
И.И., Слепушкин А.Н.)
- Научно-исследовательским институтом эпидемиологии и
микробиологии им. Н.Ф.Гамалеи (Вертиев Ю.В., Тарасевич И.В.)
2. Утверждено и введено в действие Постановлением
Госкомсанэпиднадзора России от 04.05.1994 г.
3. Вводятся впервые взамен "Инструкции о противоэпидемическом
режиме работы с материалом, зараженном или подозрительным на
зараженность возбудителями инфекционных заболеваний I-II групп",
утвержденной Минздравом СССР 29 июня 1978 г.
Закон РСФСР "О санитарно-эпидемиологическом
благополучии населения"
"Санитарные правила, нормы и гигиенические нормативы (далее -
санитарные правила) - нормативные акты, устанавливающие критерии
безопасности и (или) безвредности для человека факторов среды его
обитания и требования к обеспечению благоприятных условий его
жизнедеятельности.
Санитарные правила обязательны для соблюдения всеми
государственными органами и общественными объединениями,
предприятиями и иными хозяйствующими субъектами, организациями и
учреждениями, независимо от их подчиненности и форм собственности,
должностными лицами и гражданами" (статья 3).
"Санитарным правонарушением признается посягающее на права
граждан и интересы общества противоправное, виновное (умышленное
или неосторожное) деяние (действие или бездействие), связанное с
несоблюдением санитарного законодательства РСФСР, в том числе
действующих санитарных правил...
Должностные лица и граждане РСФСР, допустившие санитарное
правонарушение, могут быть привлечены к дисциплинарной,
административной и уголовной ответственности" (статья 27).
1. Область применения
Настоящие правила подготовлены в соответствии с "Положением о
порядке разработки, утверждения, издания, введения в действие
федеральных, республиканских и местных санитарных правил, а также
о порядке действия на территории РСФСР общесоюзных санитарных
правил", утвержденным постановлением Совета Министров РСФСР от
01.07.91 N 375 и устанавливает требования к организации работы с
микроорганизмами I-II групп патогенности.
Требования правил обязательны для выполнения всеми
учреждениями на территории Российской Федерации независимо от их
ведомственной принадлежности и форм собственности, а также
должностными лицами и гражданами, проводящими работы с
использованием микроорганизмов I-II групп патогенности (приложение
5.1) или материала, подозрительного на их содержание. <*>
--------------------------------
<*> Далее - биологический материал I-II групп патогенности.
Правила направлены на обеспечение личной и общественной
безопасности работы с биологическим материалом I-II групп
патогенности и предусматривают проведение следующих мероприятий:
- организационных, заключающихся в рациональной планировке
оборудованных соответствующими инженерно-техническими системами
помещений; обеспечении лабораторий необходимыми средствами
индивидуальной и коллективной защиты; укомплектовании
соответствующим по подготовке персоналом; использовании в работе
только проверенных, безопасных методов работы, а также надежных
средств и методов обеззараживания; наличии эффективных планов по
локализации и ликвидации последствий аварий; строгом контроле за
выполнением настоящих правил сотрудниками со стороны администрации
учреждения и комиссии по контролю за соблюдением требований
биологической безопасности <*>; обеспечении надежным источником
электроэнергии, водоснабжения и др. (степень надежности
определяется в зависимости от вида биологического материала,
характера выполняемых исследований);
- регламентирующих ограничение круга лиц, допущенных к работе
с биологическим материалом I-II групп; выезд сотрудников,
работающих с этим материалом или принимающих участие в локализации
и ликвидации эпидемических очагов; выезд населения при
эпидемических проявлениях чумы, холеры и высококонтагиозных
вирусных геморрагических лихорадок;
- специальных, предусматривающих прием на работу лиц, не
имеющих противопоказаний к вакцинопрофилактике; медицинское
наблюдение за персоналом; использование специфической
иммунопрофилактики для персонала; изоляцию и профилактическое
лечение лиц, контактировавших с возбудителем при аварии и
проведении мероприятий по тщательной дезинфекции с целью
предупреждения выноса инфекции за пределы помещения, где произошла
авария.
--------------------------------
<*> Далее - Комиссия.
2. Нормативные ссылки
В настоящих правилах использованы ссылки на следующие
нормативные документы:
2.1. Закон РСФСР "О санитарно-эпидемиологическом благополучии
населения".
2.2. Приказ Минздрава СССР от 29.09.89 г. N 555 "О
совершенствовании системы медицинских осмотров трудящихся и
водителей индивидуальных транспортных средств".
2.3. "Положение о порядке учета, хранения, обращения, отпуска
и пересылки культур бактерий, вирусов, риккетсий, грибов,
простейших, микоплазм, бактериальных токсинов, ядов биологического
происхождения". Утверждено Минздравом СССР 18.05.79 г.
2.4. "Инструкция по лиофильному высушиванию возбудителей
инфекционных заболеваний I-II групп на коллекторном аппарате
системы К.Е.Долинова". Утверждена Минздравом СССР 12.03.79 г.
2.5. Санитарно-противоэпидемические правила "Безопасность
работ с рекомбинантными молекулами ДНК". Утверждены Минздравом
СССР 12.01.89 г.
2.6. "Инструкция по первичной обработке материала, зараженного
или подозрительного на зараженность возбудителями чумы, холеры,
туляремии, бруцеллеза и сибирской язвы при проведении
гистоцитоэнзимохимических исследований". Утверждена ГУКИ МЗ СССР
(1984 г.)
2.7. "Методические указания по контролю работы паровых и
воздушных стерилизаторов". Утверждены ГЭУ Минздрава СССР (1991 г.)
2.8. "Инструкция по режиму работы с аэрозолями возбудителей
особоопасных и других бактериальных инфекций". Утверждена
Минздравом СССР 18.11.76 г.
2.9. "Правила техники безопасности, производственной санитарии
и санитарно-противоэпидемического режима для предприятий по
производству бактерийных и вирусных препаратов". Утверждены
Минздравом СССР 10.07.67 г.
3. Требования к организации работы с биологическим
материалом I-II групп патогенности
3.1. Общие
3.1.1. Работу с биологическим материалом I-II групп
патогенности разрешают лабораториям, имеющим условия для
соблюдения требований по безопасности работы, предусмотренных
настоящими правилами и полного разделения диагностических и
экспериментальных исследований (к диагностическим - относят
исследования объектов биотической и абиотической природы с
идентификацией культуры; к экспериментальным - все виды работы с
культурой возбудителей I-II групп).
3.1.2. Порядок выдачи разрешений на работу с биологическим
материалом I-II групп патогенности регламентирован "Санитарными
правилами по безопасности работы с микроорганизмами" Часть I
"Порядок выдачи разрешения на работу с микроорганизмами I-IV групп
патогенности и рекомбинантными молекулами ДНК" СП 1.2.006-93.
Исследования биологического материала I группы патогенности
проводят противочумные и другие специализированные учреждения.
3.1.3. Плановые диагностические исследования на холеру и
ботулинический токсин, выполняемые с целью профилактики этих
инфекций, проводят бактериологические лаборатории, имеющие
разрешение на работу с микроорганизмами III-IV групп.
3.1.4. Разрешение на работу с биологическим материалом I-II
групп считают недействительным при перепланировке помещений или
изменении технологии работы.
3.1.5. Проекты строительства новых и реконструкции действующих
лабораторий должны быть согласованы со службами Государственного
санитарно-эпидемиологического надзора и утверждены руководителем
учреждения.
3.1.6. Работу с биологическим материалом I-II групп выполняют
специалисты с высшим и средним медицинским, биологическим и
ветеринарным образованием (для ветеринарных учреждений),
окончившие соответствующие курсы специализации и не имеющие
противопоказаний к вакцинопрофилактике и лечению специфическими
препаратами.
3.1.7. Допуск к работе с экспериментальным и диагностическим
материалом оформляют приказом руководителя учреждения один раз в
два года после проверки знаний по безопасности работы.
Инженерно-технический персонал, дезинфекторы и лабораторные
служители проходят подготовку в структурном подразделении и
допускаются к работе в соответствии с должностными обязанностями
приказом по учреждению.
3.1.8. Разрешение на посещение лаборатории
инженерно-техническому персоналу, не работающему постоянно, выдает
руководитель учреждения. Посещение осуществляется, после
прекращения работы и проведения дезинфекции, в сопровождении
сотрудника структурного подразделения и регистрируется в журнале.
3.1.9. Специалистов (врачи медицинского и ветеринарного
профиля, биологи и др.), постоянно не работающих в учреждении,
допускают в помещения, где проводят работу с биологическим
материалом, по письменному разрешению руководителя учреждения.
Цель посещения и его продолжительность регистрируется в журнале.
3.1.10. Сотрудников, по роду работы соприкасающихся с
биологическим материалом I-II групп (кроме холеры), вакцинируют.
Имеющих противопоказания допускают к работе отдельным приказом по
учреждению. Лиц, имеющих противопоказания к прививкам, к работе в
аэрозольных лабораториях и с материалом, зараженным или
подозрительным на зараженность возбудителем лихорадки Ку, не
допускают.
3.1.11. У всех сотрудников, работающих с биологическим
материалом I-II групп (исключая холеру и яды биологического
происхождения), проводится ежедневная термометрия, результаты
которой фиксируют в журнале и заверяют подписью ответственного
врача (научного сотрудника). Для лиц, работающих с возбудителем
холеры, устанавливают обязательное обследование на
вибриононосительство в случае дисфункции желудочно-кишечного
тракта.
3.1.12. Все сотрудники, работающие с биологическим материалом
I-II групп, находятся на диспансерном наблюдении. Периодические
медицинские осмотры проводятся в соответствии с приказом Минздрава
СССР от 29.09.89 г. N 555. Работающим с глубокими микозами
осуществляется постановка аллергических проб.
3.1.13. При появлении у сотрудника симптомов, характерных для
инфекционного заболевания, вызываемого возбудителем, с которым он
работал, сотрудник обязан поставить в известность руководителя
подразделения или дежурного по учреждению. Дальнейшее решение
принимает руководитель учреждения.
3.1.14. В случае заболевания сотрудника, работавшего с
инфекционным материалом или культурами возбудителей чумы, холеры,
вирусов I группы, на квартиру больного направляют врача учреждения
с целью уточнения эпиданамнеза и решения вопроса о необходимости
его изоляции. Результаты посещения регистрируют в журнале и
доводят до сведения руководителя учреждения. Вызов врача
общемедицинской сети разрешается только после посещения больного
врачом учреждения, исключением является обращение по жизненным
показаниям. При этом, больной или его родственники должны
поставить в известность прибывшего врача о характере выполняемой
работы и информировать о случившемся руководителя структурного
подразделения.
3.1.15. Сотрудники, которые по тем или иным причинам не могут
явиться на работу, обязаны в течение двух часов поставить об этом
в известность заведующего подразделением. В случае неявки
сотрудника в учреждение в течение двух часов от начала работы и
отсутствия сведений о его местонахождении, заведующий
подразделением принимает меры по установлению его местонахождения
и причины отсутствия.
3.1.16. Перенос оборудования, лабораторной и хозяйственной
посуды, реактивов, инструментов и т.п. внутри учреждения
производят с согласия руководителей заинтересованных
подразделений. Вынос перечисленных материалов из учреждения
осуществляют после дезинфекции по письменному разрешению
руководителя учреждения.
3.1.17. Все виды работ с биологическим материалом I-II групп
патогенности, проводят с соблюдением принципа парности (не менее
двух человек, один из которых - врач или научный сотрудник). Время
непрерывной работы с таким материалом ограничивают 4-мя часами,
после которых устанавливают 30-60 минутный перерыв. Работа в
вечернее и ночное время, а также в выходные и праздничные дни
возможна по письменному разрешению руководителя учреждения при
условии соблюдения посменной работы и наличия двух человек.
3.1.18. Для индивидуальной защиты персонала используют
защитную одежду, описание которой дано в разделе 3.3. Перед сдачей
в стирку защитные костюмы обеззараживают.
3.1.19. Дезинфекцию различных объектов при работе с
биологическим материалом I-II групп патогенности проводят в
соответствии с настоящими правилами (приложение 5.4.), а также
действующими инструкциями и руководствами.
3.1.20. Запрещается вызывать сотрудников во время выполнения
ими любого вида работ с биологическим материалом.
3.1.21. Прием посетителей, общественная работа и прием пищи
разрешают только в специально отведенных помещениях.
3.1.22. Территория и помещения учреждения подлежат
круглосуточной охране.
3.1.23. При работе с биологическим материалом I-II групп
патогенности, требующей особых методических приемов, необходимо
разрабатывать дополнения к настоящим правилам с учетом требований,
изложенных в них. Дополнения, изложенные в виде методических
рекомендаций, рассматриваются комиссией и утверждаются
руководителем учреждения.
3.1.24. Противопожарные и дополнительные правила безопасности
в лаборатории (учреждении) необходимо составлять с учетом
требований настоящих правил.
3.1.25. Ответственным за организацию биологической
безопасности по учреждению в целом, является его руководитель, а
по подразделениям - их заведующие. Контроль за выполнением
требований настоящих правил возлагается в институтах на
заместителя руководителя по научной работе, в других учреждениях -
на заместителя руководителя по эпидработе.
3.1.26. Помещения микробиологических лабораторий и, в ряде
случаев, территория учреждения, по степени опасности для персонала
разделяются на три зоны:
I. "Заразная" зона - помещения, в которых проводят работу с
биологическим материалом I-II групп патогенности, персонал одет в
соответствующий тип защитной одежды.
II."Условно - заразная" зона - помещения лабораторий (в ряде
случаев территории учреждения), где не проводят работу с
биологическим материалом, персонал одет в рабочую одежду (пижама,
носки, тапочки). В пределах этой зоны осуществляют только
транспортировку биологического материала между блоками "заразной"
зоны.
III. "Чистая" зона - помещения, где не проводят работу с
биологическим материалом, персонал одет в личную одежду.
3.1.27. Сотрудники проходят из "чистой" зоны в
"условно-заразную" через санитарный пропускник. Верхнюю одежду
оставляют в индивидуальных шкафах, предназначенных для ее
хранения, меняют свою обувь на тапочки и проходят в помещение для
надевания рабочей одежды.
Разрешается проносить через санпропускник только письменные
принадлежности.
Питье воды и курение разрешается в отведенных для этого
местах. Уборку помещений "условно-заразной" зоны проводят
ежедневно с применением моющих и дезинфицирующих средств.
3.1.28. Перенос материалов и оборудования в пределах
"условно-заразной" зоны производит персонал, одетый в рабочую
одежду.
Перенос культур возбудителей в контейнерах (биксах) из одного
подразделения в другое производят лица, допущенные к работе с
биологическим материалом I-II групп, одетые в рабочую одежду, в
присутствии сопровождающего.
Перенос заразного материала в баках для автоклавирования,
поставленных в металлические поддоны с высокими (20 см) бортиками,
производит младший и средний персонал, одетый в противочумный
костюм III типа, дополненный фартуком, в сопровождении лаборанта,
допущенного к работе с биологическим материалом. Движение
осуществляют по определенным маршрутам. На время переноса
материала в автоклавную, на пути его следования, прекращается
другое движение.
3.1.29. Режим производственной деятельности в комнатах
целевого назначения "условно-заразной" зоны (радиоизотопной,
биохимической, электронной микроскопии, препараторской и т.п.)
должен соответствовать профилю выполняемой работы с соблюдением
требований техники безопасности.
В целях предупреждения аллергических заболеваний работу с
убитыми микроорганизмами, высушенными любыми способами, проводят в
вытяжных шкафах или настольных боксах с вытяжкой с последующей
влажной обработкой бокса.
3.1.30. Вход персонала в бактериологические комнаты (боксы) и
выход из них, осуществляют через предбоксы (шлюзы). Сотрудники
надевают и снимают в предбоксе (шлюзе) защитную одежду.
3.1.31. Уборку бактериологических комнат (боксов) проводит
ежедневно до начала рабочего дня младший персонал в рабочей
одежде, дополненной резиновыми перчатками, с применением
дезинфицирующих средств под наблюдением лаборанта. После влажной
уборки на 30-40 минут включают бактерицидные лампы. Лабораторные
столы и боксы безопасности готовят лаборанты.
По окончании работы с биологическим материалом объекты с
посевами переносят в хранилища (сейфы, холодильники, баки для
автоклавирования, термостаты и т.п.), проводят дезинфекцию рабочих
поверхностей в помещении, обрабатывают руки 70 град. С этиловым
спиртом и включают на 30-40 мин. бактерицидные лампы.
Перед уходом из помещения сотрудники проверяют отключение
газа, воды, ненужных приборов и пр. Помещения "заразной" зоны
лаборатории опечатывают и запирают на замок. Открывание и снятие
печатей, запирание и опечатывание всей лаборатории производят
сотрудники (научные сотрудники, врачи, лаборанты), имеющие
соответствующие разрешения руководителя учреждения (лаборатории).
3.1.32. Запрещается проведение в одном и том же помещении
диагностических и экспериментальных исследований, а также
одновременная работа с диагностическим материалом и живыми
вакцинами.
Запрещается проведение любого вида экспериментальных работ с
вирулентными антибиотико-устойчивыми штаммами, если в учреждении
не имеется лекарственных препаратов (не менее двух) к которым
чувствительны используемые штаммы.
Разрешается проведение одновременной работы с разными видами
возбудителей в одной бактериологической комнате, если это вызвано
производственной необходимостью. При этом биологическая
безопасность обеспечивается требованиями, предъявляемыми к работе
с наиболее опасным видом.
3.1.33. Просмотр агаровых культур, проведение
бактериологической работы с диагностическим материалом, а также с
10
низкими концентрациями (менее 10 КОЕ/мл) <*> и малыми объемами
(менее 500 мл) вирулентных культур возбудителей I-II групп (кроме
сапа, мелиоидоза и возбудителей глубоких микозов) осуществляют за
бактериологическим столом в противочумном костюме IV типа. При
работе с возбудителями сапа, мелиоидоза и глубоких микозов костюм
IV типа дополняют респиратором и перчатками.
--------------------------------
<*> КОЕ - число колоний-образующих единиц или число микробных
клеток в 1 миллилитре.
Работу с высокими концентрациями (более 10 КОЕ/мл), большими
объемами (более 500 мл), при отсутствии боксов безопасности
проводят в противочумном костюме I типа (без сапог).
3.1.34. Заражение эктопаразитов возбудителями I-II групп на
биомембране (помещенной в емкость с высокими бортиками),
растирание и посев зараженных эктопаразитов на питательные среды
проводят за бактериологическим столом в костюме IV типа,
дополненным ватно-марлевой повязкой и резиновыми перчатками.
Просмотр зараженных эктопаразитов проводят в костюме IV типа.
Хранение зараженных эктопаразитов осуществляют в пробирках и
флаконах, помещенных в холодильники, термостаты, шкафы.
3.1.35. При пипетировании необходимо пользоваться грушами или
автоматическими устройствами. При этом кончик пипетки всегда
должен быть ниже уровня жидкости в сосуде, или жидкость из пипетки
должна стекать по внутренней стенке сосуда. Запрещается
переливание жидких культур, продувание через них воздуха из
пипеток. Сбор культур с поверхности агара следует проводить
петлей, металлическим, стеклянным или пластиковым шпателем.
Перед использованием посуда, пипетки, оборудование, шприцы и
т.д. должны быть проверены на целостность и исправность.
Бактериологическая петля должна быть замкнута в непрерывное
кольцо и иметь плечо длиной не более 6 см.
3.1.36. Запрещается фиксировать мазки нагреванием. Для
фиксации используют 96 град. С этиловый спирт, смесь Никифорова
(равное количество спирта и эфира), а при исследовании материала,
содержащего возбудителя сибирской язвы или неизвестной этиологии -
96 град. С этиловый спирт с добавлением 3% перекиси водорода.
Время фиксации - 30 мин.
3.1.37. Запрещается оставлять после окончания работы на
открытых местах или в неопечатанных хранилищах нефиксированные
мазки, объекты с посевами и другие материалы, содержащие
биологический материал.
Разрешается оставлять на столах и в боксах безопасности посуду
надписанную, но не засеянную, сделав соответствующую надпись.
При необходимости кратковременного выхода (5-10 мин.) из
бактериологической комнаты, сотрудник может оставить объекты с
биологическим материалом на столе (в боксе безопасности), если в
комнате остается другой сотрудник, или дверь комнаты запирается на
замок.
3.1.38. Работу, связанную с риском образования аэрозоля
вирулентных микроорганизмов (с высокими концентрациями и большими
объемами возбудителей, центрифугирование, гомогенизирование,
измельчение тканей, разрушение возбудителей, перенос
репликаторами, шуттелирование и т.п.) проводят в боксах
безопасности персоналом, одетым в костюм IV типа.
Проведение центрифугирования, шуттелирования и встряхивания
культур на аппаратах без защиты (не установленных в боксах
безопасности) возможно, как и в боксах безопасности, только в том
случае, если контейнеры, содержащие материал, будут выполнены из
небьющегося материала и снабжены завинчивающимися герметичными
крышками. При этом персонал должен быть одет в костюм I типа.
3.1.39. Перед началом работы в боксе безопасности включают
вытяжную вентиляцию, по шкале боксового манометра проверяют
наличие отрицательного давления, проверяют исправность
оборудования в боксе и загружают материал.
Вся работа должна выполняться ближе к задней стенке бокса и
быть видимой снаружи.
Во время работы запрещается открывать дверь бокса
безопасности, а после ее прекращения дверь может быть открыта
только тогда, когда заразный материал убран в контейнеры и
проведена текущая дезинфекция (приложение 5.4.).
После удаления контейнеров с биологическим материалом, дверь
бокса безопасности закрывают, внутри бокса включают бактерицидные
лампы.
Следует учитывать, что боксы безопасности В/О "Изотоп",
выполненные из органического стекла, взрыво- и пожароопасны,
поэтому для обжига бактериологических петель целесообразно
использовать электронагревательные устройства или спиртовки, а не
газовые горелки.
3.1.40. Хранение биоматериала I-II групп патогенности, учет
их, обмен с другими учреждениями и уничтожение осуществляют
согласно действующему "Положению о порядке учета, хранения,
обращения, отпуска и пересылки культур бактерий, вирусов,
риккетсий, грибов, простейших, микоплазм, бактерийных токсинов,
ядов биологического происхождения".
3.1.41. Культуры возбудителей I-II групп, выделенные при
диагностических исследованиях, передают в территориальные
противочумные институты или головные по проблемам учреждения.
Перевозку этих штаммов проводят с разрешения руководителей этих
учреждений. Акты на передачу и уничтожение оформляют в
установленном порядке.
На противочумных станциях разрешается хранить минимальное
количество (определяемое территориальным противочумным институтом)
культур типичных и атипичных для данного природного очага,
необходимых для научной и практической работы.
Лаборатории, не имеющие разрешения на работу с возбудителем
холеры, после идентификации передают культуры в территориальное
противочумное учреждение или уничтожают по согласованию с ним.
В учреждениях (институтах), работающих с микроорганизмами I-II
групп, разрешается иметь коллекции (музей) штаммов для проведения
научных исследований и набор типовых культур для диагностических
целей.
3.1.42. Надписи на объектах с культурами и посевами должны
быть четкими с подробным обозначением засеянного материала и
указанием даты посева.
Объекты с культурами возбудителей хранят в металлических
водонепроницаемых емкостях с плотно закрывающимися крышками,
которые помещают в холодильники или железные шкафы. Допускается
временное хранение культур, подготовленных для автоклавирования, в
баках из термостойкого материала (металл, пластик) с отверстиями в
верхней части. Баки, опечатанные печатью научного сотрудника
(врача), при хранении помещают в поддоны с бортиками высотой 20
см.
Все хранилища (термостаты, холодильники и шкафы) запирают на
замок и опечатывают. Ключи от хранилищ и личные печати находятся
непосредственно у сотрудников или у заведующего подразделением
(лабораторией).
Вакцинные штаммы хранят отдельно от патогенных.
Антибиотикорезистентные - отдельно от чувствительных. Не
допускается хранение в одном холодильнике живых культур
микроорганизмов и диагностических или лечебных препаратов.
3.1.43. Работу по лиофилизации культур возбудителей
инфекционных заболеваний I-II групп проводят в соответствии с
действующей "Инструкцией по лиофильному высушиванию возбудителей
инфекционных заболеваний I-IV групп на коллекторном аппарате
системы К.Е.Долинова". Допускается использование более современных
аппаратов.
3.1.44. Ампулы с высушенными культурами вскрывают в помещении
музея (коллекции) живых культур в боксе с вытяжной системой
вентиляции. При этом оттянутый конец ампулы нагревают над пламенем
горелки, затем влажным концом стерильного ватного тампона
прикасаются к нагретой части, в результате чего появляются
трещины. Конец ампулы накрывают трехслойной марлевой салфеткой,
смоченной дезраствором и хорошо отжатой, и обламывают пинцетом.
После вскрытия ампула остается накрытой той же салфеткой в течение
одной-двух минут. Затем салфетку осторожно снимают и вместе с
остатками стекла погружают в дезраствор. Вскрытую ампулу накрывают
стерильным марлевым тампоном на 1-2 мин., затем в ампулу вносят
раствор для приготовления взвеси, которую далее высевают на
твердые и жидкие питательные среды. Посевы культур на питательных
средах выдают в лаборатории.
3.1.45. Лаборатории ведут учет биологического материала по
утвержденным формам и в специальных журналах.
Журналы должны быть пронумерованы, прошнурованы и скреплены
печатью.
3.1.46. При проведении серологических исследований производят
предварительное обеззараживание материала:
- сыворотки и суспензии крови обеззараживают добавлением
мертиолята натрия, проверенного на бактерицидное действие, до
концентрации 1:10000 с последующим прогреванием их при 56 град. С
в течение 30 мин. Для забора крови и смывов с внутренних органов
допускается использование фильтровальной бумаги, пропитанной
мертиолятом натрия в концентрации 1:1000, обеззараживание
наступает после часовой экспозиции при комнатной температуре;
- суспензии внутренних органов или костного мозга животных,
материал от больных людей, а также бактериальные взвеси чумы,
туляремии, бруцеллеза, обеззараживают добавлением проверенного на
бактерицидное действие формалина до 1-2% концентрации с
последующим выдерживанием не менее 12 часов или до концентрации 4%
с экспозицией при комнатной температуре 1 час. Культуры холерного
вибриона обеззараживают кипячением в течение 30 минут.
Эффективность обеззараживания контролируют пробой на специфическую
стерильность.
При необходимости проведения срочного анализа на наличие
антигенов возбудителей I-II групп и отсутствии времени для
обеззараживания материала или постановки пробы на стерильность,
серологические реакции ставят в пробирках с круглым дном.
Лабораторную посуду и инструменты обеззараживают.
3.1.47. Все работы, связанные с приемом и первичной обработкой
биологического материала - от людей, грызунов, эктопаразитов, проб
внешней среды и т.д., а также заражение животных и их
исследование, разрешается проводить только в помещениях блока для
инфицированных животных. Заражение лабораторных животных проводит
врач совместно с лаборантом.
Вскрытие диких и биопробных животных и посев органов для
бактериологического исследования проводит врач или лаборант. При
исследовании полевого материала дезинфектору может быть поручен
очес и вскрытие диких грызунов, а взятие материала на исследование
проводит врач или лаборант. Уборку в помещениях для инфицированных
животных, уход за ними и кормление проводят лаборанты и
дезинфекторы. В исключительных случаях при исследовании полевого
материала к уборке могут быть привлечены по приказу руководителя
учреждения лабораторные служители.
Посещение блока для инфицированных животных регистрируют в
журнале с указанием времени пребывания и характера выполненных
работ.
Вход персонала в блок для работы с инфицированными животными
осуществляют через комнату для надевания защитной одежды, а выход
- через комнату для снятия и обеззараживания защитной одежды.
Запрещается в одной и той же комнате надевать защитную одежду и
снимать ее после работы с биологическим материалом.
3.1.48. Мелких животных и эктопаразитов содержат в помещениях
блока для инфицированных животных с соблюдением следующих правил:
- мелких животных помещают в банки, ящики и садки заранее
осмотренные на целостность, на которые прикрепляют заполненные
этикетки. Ящики и банки закрывают сетчатыми крышками, не
допускающими выбегания животных;
- эктопаразитов помещают в банки и флаконы, плотно завязанные
мелкосетчатым материалом, а также в пробирки, закрытые
ватно-марлевой или корковой пробкой;
- банки со зверьками помещают на металлические (деревянные)
стеллажи, окрашенные масляной краской, или в засетченные шкафы, а
сосуды с эктопаразитами - в такие же шкафы, холодильники или
термостаты;
- банки с животными, зараженными возбудителями сибирской язвы,
глубоких микозов, размещают на металлических или деревянных, но
обитых железом стеллажах;
- при накоплении в банках или садках большого количества
подстилочного материала (1/3 банки), животных пересаживают в
чистые банки, а используемые заливают дезраствором или
автоклавируют (приложение 4).
3.1.49. В зависимости от характера выполняемой работы в блоке
для инфицированных животных, степени ее опасности для персонала,
используют строго определенные типы защитной одежды:
- при исследовании материала от больных с подозрением на чуму,
глубокие микозы, сап, мелиоидоз или с неясной этиологией
используют защитный костюм I типа; на сибирскую язву, туляремию,
бруцеллез, холеру, легионеллез - костюм II типа;
- при исследовании дикоживущих грызунов и биопробных животных,
а также их трупов (взвешивание, измерение, очес, выбор
эктопаразитов, вскрытие, посев органов, приготовление суспензий,
разбор гнезд) - защитный костюм II типа;
- при заражении биопробных животных материалом от дикоживущих
грызунов и других объектов, подозрительных на чуму, глубокие
микозы, сап, мелиоидоз - используют костюм I типа; материалом,
подозрительным на зараженность возбудителями сибирской язвы,
туляремии, бруцеллеза, холеры и легионеллеза - костюм II типа;
- при заражении лабораторных животных вирулентными культурами
возбудителей чумы, сапа, мелиоидоза, сибирской язвы, туляремии,
бруцеллеза, глубоких микозов и проведении всех манипуляций с
зараженными животными (взятие крови, измерение температуры,
кормление эктопаразитов на грызунах, их очес, лечение и пересадка
животных, кормление их и т.д.) и их вскрытии используют костюм I
типа;
- при заражении лабораторных животных культурами возбудителей
холеры, легионеллеза, а также исследовании таких животных и их
вскрытии, применяют костюм II типа.
3.1.50. Живых грызунов, предназначенных для вскрытия,
умерщвляют хлороформом, эфиром или другими соответствующими
требованиям биологической безопасности и характеру исследования
способами.
При вскрытии грызунов врач (лаборант) захватывает труп
длинными щипцами (корнцангами), погружает его на 10-15 секунд в 3%
водно-мыльный раствор и, дав ему стечь (на сетке), переносит на
доску для вскрытия.
Вскрытое животное после взятия материала на исследование
обеззараживают. Животных, погибших от мелиоидоза, для полного
обеззараживания, выдерживают в 5% растворе лизола в течение 7
суток. После вскрытия животных инструменты, доски для вскрытия,
банки, бачки, садки из-под животных и т.д. обеззараживают
(приложение 4).
Для утилизации твердых обеззараженных отходов и тушек
животных, используют крематорий или выделенные и согласованные с
территориальным Центром Госсанэпиднадзора места захоронения. При
отсутствии крематория и выделенных мест захоронения на территории
учреждения выкапывают яму, расположенную как можно дальше от
коммуникаций или колодца, с соблюдением следующих условий:
- яма глубиной 1,5-2 метра не должна доходить до водоносного
слоя;
- яму закрывают плотным без щелей настилом с люком,
запирающимся на замок;
- окружность ямы должна возвышаться для предохранения от
затопления дождевыми или паводковыми водами;
- после каждого сброса материала, его заливают
свежеприготовленными дезинфицирующими растворами (20% хлорной
извести, черной карболки, крезолов и т.п.);
- при заполнении ямы (не более, чем 1 м до поверхности) ее
засыпают доверху землей и утрамбовывают. Настил можно снять и
использовать повторно.
При необходимости вскрытия грызунов и их исследования в
малонаселенных или не заселенных людьми местах обеззараженные
трупы вскрытых грызунов разрешается закапывать в специально
вырываемые каждый раз ямы.
3.1.51. В максимально изолированных лабораториях при работе в
блоках для инфицированных животных заражение, вскрытие и все
другие манипуляции с животными проводят в системе боксов
безопасности, а содержание животных - в вентилируемых шкафах
пониженного давления. Работу и уборку проводит персонал, одетый в
противочумный костюм II типа.
3.1.52. Дезинфекцию биологического материала проводят в
соответствии с действующими документами и приложением 5.4., 5.8.
настоящих правил.
Введение в практику новых средств дезинфекции, дезинсекции и
дератизации допускается только после их испытания и с разрешения
Госкомсанэпиднадзора России. Все поступающие на склад серии
дезинфекционных средств должны быть проверены на активность с
выдачей заключения об их пригодности.
Методы и средства обеззараживания определяют в каждом
конкретном случае в зависимости от вида возбудителя, характера и
объема обеззараживаемого материала.
Записи результатов исследований и подсчета объектов с
биологическим материалом ведут на отдельных листах (протоколах),
которые обеззараживают погружением в дезинфектант. Передача
обеззараженного материала между лабораториями одного учреждения и
за его пределы допускается после проверки на специфическую
стерильность. Передачу такого материала за пределы учреждения
проводят с разрешения руководителя учреждения.
3.1.53. В лабораториях должно быть достаточное количество
дезинфицирующих растворов, неприкосновенный запас их на случай
аварии. Емкости с дезрастворами маркируют. При работе с
эктопаразитами те же требования предъявляют к дезинсектантам.
Дезинфицирующие растворы готовит лаборант или дезинфектор, за
качеством приготовления их следит врач. Дезинфицирующие растворы
применяют свежеприготовленными.
Ответственность за правильное обеззараживание материала
возлагается на руководителя структурного подразделения или
выделенного для этого врача (научного сотрудника). При наличии
централизованной автоклавной, ответственность за обеззараживание
несет заведующий автоклавной.
3.1.54. Работа с рекомбинантными молекулами ДНК
регламентируется санитарно-противоэпидемическими правилами
"Безопасность работы с рекомбинантными молекулами ДНК".
Гистоцитоэнзиматические исследования проводят в соответствии с
требованиями действующей "Инструкцией по первичной обработке
материала, зараженного или подозрительного на зараженность
возбудителями чумы, холеры, туляремии, бруцеллеза и сибирской язвы
при проведении гистоцитоэнзимохимических исследований".
3.1.55. Новые методы и методические приемы перед
использованием их в лабораторной практике должны быть рассмотрены
комиссией учреждения по контролю за соблюдением требований
биологической безопасности и утверждены его руководителем.
3.1.56. Лаборатории, проводящие работу с биологическим
материалом, должны иметь на случай ликвидации последствий аварии
аптечку экстренной профилактики, запас рабочей и защитной одежды,
гидропульт или автомакс, которые хранят в специально отведенном
месте "условно-заразной" зоны.
В аптечке экстренной профилактики должны находиться 70 град. С
этиловый спирт, 1% раствор протаргола, йод, сухой марганцевокислый
калий, стерильная дистиллированная вода, набор антибиотиков
специфического действия, глазные пипетки, шприц для приготовления
растворов антибиотиков, ножницы, перевязочные средства.
В аптечке микологической лаборатории должен быть 1% раствор
борной кислоты.
Лаборатории, проводящие работу с ботулиническим токсином,
должны иметь гомологичные антитоксические сыворотки.
Срок годности препаратов и комплектность аптечки проверяет
ответственный врач, назначенный руководителем подразделения.
3.1.57. Учреждения, проводящие работу с биологическим
материалом I-II групп патогенности, регулярно проводят контроль
эффективности фильтров вытяжной системы вентиляции (приложение
5.7.); контроль наличия в сточных водах остаточной концентрации
дезинфектанта (приложение 5.9.) и исследования их на патогенную
микрофлору, а при работе с вирулентными культурами сибирской язвы
- контроль на обсемененность помещения 1 раз в месяц.
3.2. К помещениям и оборудованию микробиологических
лабораторий
3.2.1. Стационарные лаборатории, в которых проводят работу с
биологическим материалом I-II группы патогенности, должны иметь
следующий основной набор помещений:
В "заразной" зоне:
- бокс(ы), отделенные от "условно-заразной" зоны предбоксами
или шлюзами;
- блок для работы с инфицированными животными, состоящий из
комнаты для приема и первичной обработки биологического материала,
комнаты для работы с этим материалом (заражение, вскрытие, посев),
комнаты обеззараживания инвентаря для содержания биопробных
животных (клетки, садки и др.) и комнаты для содержания зараженных
животных. Блок для работы с инфицированными животными отделен от
"условно-заразной" зоны боксами для надевания и снятия защитной
одежды (принципиальные схемы планировки комнат блока представлены
на рисунке 1);
- автоклавная для обеззараживания материала;
- термостатная (может отсутствовать).
В "условно-заразной" зоне:
- комната(ы) целевого назначения - люминесцентная,
биохимическая, серологическая и другие для работы только с
обеззараженным материалом;
- подготовительная(ые) комната(ы) - лаборантская,
препараторская и другие;
- комната(ы) для ведения записей в рабочих журналах;
- коридоры.
Помещения "условно-заразной" зоны отделены от помещений
"чистой" зоны санитарными пропускниками.
В "чистой" зоне:
- комната (гардероб) для верхней одежды;
- комната(ы) для административной работы, для работы с
литературой, приема пищи, отдыха и т.п.
3.2.2. Блок для работы с инфицированными животными,
автоклавная для обеззараживания, подготовительные, санитарные
пропускники могут быть использованы несколькими подразделениями
одного учреждения.
3.2.3. Лаборатории размещают, как правило, в отдельном здании
с 2-мя входами или в тупиковом конце его. На входной двери должны
быть обозначены название (номер) лаборатории и международный знак
"Биологическая опасность" (рис.2). Дверь должна иметь запирающее
устройство. Все помещения лаборатории должны быть непроницаемы для
грызунов.
3.2.4. Общие требования к помещениям "заразной" зоны.
Помещения должны быть изолированы от других зон. Освещенность
устанавливают в зависимости от вида работ согласно требованиям
СНиП. Пол, стены и потолок должны быть гладкими, легко моющимися,
устойчивыми к действию дезинфицирующих средств, полы не должны
быть скользкими.
Выступающие и проходящие трубы (батареи отопления) должны
располагаться на достаточном расстоянии от стен с целью
возможности их дезинфекции, места ввода инженерных коммуникаций,
|
