Утверждаю
Первый заместитель Председателя
Госкомсанэпиднадзора России,
Заместитель Главного
государственного санитарного
врача Российской Федерации
С.В.СЕМЕНОВ
31 октября 1996 года
Дата введения -
с момента утверждения
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ 2-АМИНОЭТИЛСЕРНОЙ КИСЛОТЫ В АТМОСФЕРНОМ
ВОЗДУХЕ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
МУК 4.1.595-96
1. Подготовлены творческим коллективом специалистов в составе:
Малышева А.Г. (руководитель), Зиновьева Н.П., Суворова Ю.Б.,
Растянников Е.Г., Топорова И.Н., Евстигнеева М.А., Жаворонкова
Н.А. (НИИ экологии человека и гигиены окружающей среды им. А.Н.
Сысина РАМН), при участии Кучеренко А.И. (Госкомсанэпиднадзор
России).
2. Утверждены и введены в действие Первым заместителем
Председателя Госкомсанэпиднадзора России - заместителем Главного
государственного санитарного врача Российской Федерации Семеновым
С.В. 31 октября 1996 года.
3. Введены впервые.
Настоящие Методические указания устанавливают высокоэффективную
жидкостную хроматографическую методику количественного химического
анализа атмосферного воздуха для определения в нем содержания 2-
аминоэтилсерной кислоты в диапазоне концентраций 0,01 - 0,1
мг/куб. м.
H N-СН -СН -О-SO Н Мол. масса 141,0
2 2 2 3
2-Аминоэтилсерная кислота - вещество белого цвета, без запаха.
Температура плавления - 270 - 279 -С. Растворима в воде, не
растворима в спирте, эфире. В воздухе находится в виде аэрозоля.
Обладает сильным кожно-резорбтивным действием. ПДК для
атмосферного воздуха населенных мест - 0,02 мг/куб. м.
1. Погрешность измерений
Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, не
превышающей +/- 22%, при доверительной вероятности 0,95.
2. Метод измерений
Измерение концентрации 2-аминоэтилсерной кислоты выполняют
методом высокоэффективной жидкостной хроматографии со
спектрофотометрическим детектированием. Концентрирование 2-
аминоэтилсерной кислоты из воздуха осуществляют на фильтр АФА-ХП-
20. Экстракцию вещества с фильтра проводят дистиллированной водой.
Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 0,06
мкг.
Определению не мешают: этанол, этиламин, диэтиламин.
3. Средства измерений, вспомогательные устройства,
материалы, реактивы
При выполнении измерений применяют следующие средства
измерений, вспомогательные устройства, материалы и реактивы.
3.1. Средства измерений
Хроматограф жидкостный "Милихром"
Барометр-анероид М-67 ТУ 2504-1797-75
Весы аналитические ВЛА-200 ГОСТ 24104-80Е
Линейка измерительная ГОСТ 17435-72
Лупа измерительная ГОСТ 8309-75
Меры массы ГОСТ 7328-82Е
Посуда стеклянная лабораторная ГОСТ 1770-74Е
рН-метр ГОСТ 15150-69
Секундомер СДС пр-1-2-000 ГОСТ 5072-79
Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2;
пределы 0 - 55 -С, цена деления 1 -С ГОСТ 215-73Е
Электроаспиратор М-822 МРТУ 42-862-64
3.2. Вспомогательные устройства
Хроматографическая металлическая колонка
64 х 2 мм
Аппарат для встряхивания пробирок АВ-30С ТУ 64-1-2451-78
Воронка фильтровальная со стеклянным
пористым фильтром ВФ-20/16
Дистиллятор ТУ 61-1-721-79
Испаритель ротационный ИР-1М ТУ 25-11-917-76
Колба Бунзена объемом 250 куб. см
Фильтродержатель ТУ 95-7205-77
Фильтродержатель для мембранного
капронового фильтра, производство
МО КНПО "Диагностикум"
3.3. Материалы
Сорбент Силасорб SPHC18, фракция 5 мкм,
насадка для хроматографической колонки (Чехия)
Фильтр АФА-ХП-20
Фильтр мембранный капроновый
(25 мм х 0,2 мкм), производство МО КНПО
"Диагностикум"
3.4. Реактивы
Ацетонитрил для жидкостной хроматографии,
ОП-3, ос.ч. ТУ 6-09-14-2167-84
Дистиллированная вода ГОСТ 6709-72
Калий фосфорнокислый однозамещенный, х.ч. ГОСТ 4198-65
Кислота 2-аминоэтилсерная, ч. ТУ 6-09-15-873-87
Кислота ортофосфорная, х.ч. ГОСТ 6552-58
4. Требования безопасности
4.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности,
установленные для работы с токсичными, едкими и
легковоспламеняющимися веществами по ГОСТу 12.1.005-88.
4.2. При выполнении измерений с использованием жидкостного
хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии
с ГОСТом 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.
5. Требования к квалификации операторов
К выполнению измерений допускают лиц, имеющих квалификацию не
ниже инженера-химика, с опытом работы на жидкостном хроматографе.
6. Условия измерений
При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу
проводят в нормальных условиях согласно ГОСТу 15150-69 при
температуре воздуха (20 +/- 10) -С, атмосферном давлении 630 - 800
мм рт. ст. и влажности воздуха не более 80%;
- выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в
условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
7. Подготовка к выполнению измерений
Перед выполнением измерений проводят следующие работы:
приготовление растворов, установление градуировочной
характеристики, отбор проб.
7.1. Приготовление растворов
Исходный раствор 2-аминоэтилсерной кислоты для градуировки (с =
1 мг/куб. см)
50 мг 2-аминоэтилсерной кислоты вносят в колбу вместимостью 50
куб. см, доводят до метки дистиллированной водой и перемешивают.
Срок хранения раствора - 1 месяц в холодильнике.
0,1 М раствор калия фосфорнокислого однозамещенного, рН = 2
1,36 г вещества вносят в мерную колбу вместимостью 100 куб. см
и доводят объем до метки дистиллированной водой. Величину рН = 2
устанавливают, используя 1% раствор ортофосфорной кислоты.
1% раствор ортофосфорной кислоты
0,535 куб. см ортофосфорной кислоты растворяют в 100 куб. см
дистиллированной воды. Элюентом является смесь ацетонитрила с 0,1
М раствором однозамещенного фосфорнокислого калия в соотношении
25:75.
7.2. Установление градуировочной характеристики
Градуировочную характеристику устанавливают на градуировочных
растворах 2-аминоэтилсерной кислоты. Она выражает зависимость
площади пика на хроматограмме (кв. мм) от массы 2-аминоэтилсерной
кислоты (мкг) и строится по 5-ти сериям растворов для градуировки.
Каждую серию, состоящую из 6-ти градуировочных растворов, готовят
в мерных колбах вместимостью 50 куб. см. Для этого в каждую колбу
вносят рабочий раствор для градуировки в соответствии с табл. 1,
доводят объем дистиллированной водой до метки и тщательно
перемешивают.
Таблица 1
-------------------------------T-----T-----T-----T-----T----T----¬
¦Номер раствора для градуировки¦ 1 ¦ 2 ¦ 3 ¦ 4 ¦ 5 ¦ 6 ¦
+------------------------------+-----+-----+-----+-----+----+----+
¦Объем исходного раствора ¦0,4 ¦0,8 ¦1,0 ¦2,0 ¦4,0 ¦5,0 ¦
¦(с = 1 мг/куб. см), куб. см ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
+------------------------------+-----+-----+-----+-----+----+----+
¦Содержание 2-аминоэтилсерной ¦0,08 ¦0,16 ¦0,2 ¦0,4 ¦0,8 ¦1,0 ¦
¦кислоты в 10 куб. мм, мкг ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
L------------------------------+-----+-----+-----+-----+----+-----
2 - 3 куб. см каждого градуировочного раствора фильтруют через
мембранный фильтр, затем хроматографируют 10 куб. мм в следующих
условиях:
скорость подачи элюента 100 куб. мм/мин.
длина волны 200 нм
диапазон чувствительности детектора 1,6
время измерения 0,6 сек.
абсолютное время удерживания
2-аминоэтилсерной кислоты 10 мин. 35 сек.
элюирующий объем 1058 куб. мм
На хроматограмме рассчитывают площади пиков 2-аминоэтилсерной
кислоты и по средним значениям из 5-ти измерений устанавливают
градуировочную характеристику. Проверку градуировочной
характеристики проводят 1 раз в квартал и при смене партии
реактивов.
7.3. Отбор проб
Отбор проб производится согласно ГОСТу 17.2.3.01-86.
Воздух со скоростью 20 куб. дм/мин. аспирируют через фильтр АФА-
ХП-20 в течение 30 мин. Срок хранения проб - 5 дней в
холодильнике.
8. Выполнение измерений
Фильтр с пробой помещают в пробирку с 3,0 куб. см
дистиллированной воды, встряхивают в течение 5 мин., затем
экстракт декантируют в мерную пробирку. Эту операцию повторяют 2
раза, каждый раз используя 2 куб. см дистиллированной воды.
Объединенные экстракты упаривают на вакуумном испарителе до объема
1,0 куб. см (эффективность экстракции с фильтра 0,98). После
фильтрования через мембранный фильтр в хроматограф вводят 10 куб.
мм экстракта и анализируют в условиях, указанных в п. 7.2.
На хроматограмме рассчитывают площадь пика и по градуировочной
характеристике определяют массу 2-аминоэтилсерной кислоты в пробе.
9. Вычисление результатов измерений
Концентрацию 2-аминоэтилсерной кислоты в атмосферном воздухе
(мг/куб. м) вычисляют по формуле:
m х V х 1000
1
С = -------------,
V х V
2 0
где:
m - масса 2-аминоэтилсерной кислоты в пробе, найденная по
градуировочной характеристике, мкг;
V - объем анализируемой пробы после упаривания, куб. см;
1
V - объем пробы, введенной в хроматограф, куб. мм;
2
V - объем пробы воздуха, приведенный к нормальным условиям,
0
куб. дм;
V х 273 х Р
t
V = ---------------,
0 (273 + t) х 760
где:
V - объем воздуха, отобранный для анализа, куб. дм;
t
Р - атмосферное давление в месте отбора пробы, мм рт. ст.;
t - температура воздуха в месте отбора пробы, -С.
Методические указания разработаны Мищихиным В.А. и Маруженковым
Д.С. (Москва, Бюро СМЭ ГУЗМ).
|
