Утверждаю
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации
Г.Г.ОНИЩЕНКО
6 июля 1999 года
Дата введения -
6 сентября 1999 года
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ИОНОВ ФТОРА В МОЧЕ
С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ИОНСЕЛЕКТИВНОГО ЭЛЕКТРОДА
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
МУК 4.1.773-99
1. Разработаны под редакцией академика РАЕН, д.м.н., проф.
Зайцевой Н.В., к.б.н. Улановой Т.С., к.б.н. Нурисламовой Т.В.,
Карнажицкой Т.Д., Суетиной Г.Н., Поповой Н.В., Митрофановой В.М.,
Плаховой Л.В., Рудаковой Е.А. (ПНИКИ детской экопатологии).
2. Утверждены Главным государственным санитарным врачом
Российской Федерации 6 июля 1999 г.
Методические указания разработаны в соответствии с
требованиями ГОСТа 8.563-96 "Методики выполнения измерений", ГОСТа
Р 1.5-92 "Общие требования к построению, изложению, оформлению и
содержанию стандартов". Методика анализа метрологически
аттестована и обеспечивает определение фторид-иона в диапазоне
концентраций 0,19 - 20,0 мкг/куб. см.
_
F Мол. масса - 19,01
Методика обеспечивает выполнение измерений с суммарной
погрешностью результата измерений 15% при доверительной
вероятности 0,95.
СУЩНОСТЬ МЕТОДА
Методика основана на измерении потенциала электрода,
селективного к ионам фтора. По величине электродного потенциала из
градуировочной зависимости находят концентрацию в пробе ионов
фтора.
Нижний предел измерения в объеме пробы - 0,285 мг.
Определению не мешают фосфат-ионы, хлорид-ионы, сульфат-ионы,
ионы кальция, магния и другие ионы. Мешающее влияние высоких
концентраций гидроксид-ионов, ионов железа (III) и алюминия
устраняют введением в анализируемую пробу буферного раствора - 20
мин.
СРЕДСТВА ИЗМЕРЕНИЙ, ВСПОМОГАТЕЛЬНЫЕ УСТРОЙСТВА,
РЕАКТИВЫ И МАТЕРИАЛЫ
При выполнении анализа применяют следующие средства измерений,
вспомогательные устройства, материалы и реактивы.
Средства измерений
Иономер лабораторный автоматизированный
ИЛА-2 или аналогичный
Магнитная мешалка
Электрод фторид-селективный твердоконтактный КСРШ.418422.006 ТУ
ЭК120102 или другого типа с аналогичными
характеристиками
Электрод вспомогательный лабораторный ТУ 25.05.2181-77
хлорсеребряный ЭВЛ-1М3.1 или другого
типа с аналогичными характеристиками
Весы аналитические 2 класса точности ГОСТ 24104
Весы технические лабораторные 4 класса
точности с пределом взвешивания 200 г
Разновесы Г -210 ГОСТ 73208-82
2
Разновесы Г -1111,10 ГОСТ 73208-82
4
Колбы мерные вместимостью 100, 250, ГОСТ 1770-74
1000 куб. см
Пипетка градуированная вместимостью ГОСТ 20292
10 куб. см
Пипетки с одной меткой вместимостью 10, ГОСТ 20292
20 куб. см
Цилиндры мерные вместимостью 25 куб. см ГОСТ 1770-74
Стаканы химические вместимостью 50 и ГОСТ 25336
500 куб. см
Стаканчики для взвешивания (бюксы) ГОСТ 25336.
Вспомогательные устройства
Шкаф сушильный ШСС 80П УХЛ4.2 ТУ 64-1-909-80
Дистиллятор ТУ 61-1-721-79.
Реактивы
Стандартный образец фторид-ионов или ГОСТ 44632.2.2
натрия фторид NaF, ч.д.а.
Натрия хлорид NaCl, x.ч. ГОСТ 4233
Натрия ацетат, тригидрат СН СООNа х 3Н О, х.ч. ГОСТ 199
3 2
Натрия цитрат, гидрат Nа С Н О х 5Н О, ч.д.а. ГОСТ 122280
3 6 5 7 2
Калия хлорид КСl, х.ч. ГОСТ 4234
Кислота уксусная ГОСТ 61
Вода дистиллированная ГОСТ 6709-72.
ТРЕБОВАНИЯ К БЕЗОПАСНОСТИ
Помещение для проведения измерений должно соответствовать
требованиям "Пожарных норм проектирования зданий и сооружений"
(СНиП ПА-5-700) и "Санитарных норм проектирования промышленных
предприятий" (СН 245-71) и СНиП-74.
При выполнении работ должны быть соблюдены меры
противопожарной безопасности в соответствии с требованиями ГОСТа
12.1.004-85 и правила техники безопасности в соответствии с ГОСТом
12.1.007-76.
При работе необходимо соблюдать "Правила по технике
безопасности и производственной санитарии при работе в химических
лабораториях", утверждены МЗ СССР 20.12.82 (М., 1981), и "Правила
устройства и безопасной эксплуатации сосудов, работающих под
давлением", утверждены Госгортехнадзором СССР 27.11.87 (М.: Недра,
1989).
При работе с реактивами соблюдают требования безопасности,
установленные для работ с токсичными, едкими и
легковоспламеняющимися веществами по ГОСТу 12.1.005-88.
При выполнении измерений на иономере должны быть соблюдены
меры безопасности, указанные в "Руководстве по правилам
эксплуатации иономера" и правила электробезопасности в
соответствии с ГОСТом 12.1.019-79.
ТРЕБОВАНИЯ К КВАЛИФИКАЦИИ ОПЕРАТОРА
К выполнению определений допускаются лица, прошедшие обучение
методам анализа на иономере, имеющие опыт работы в данной области
и ознакомленные с инструкцией по эксплуатации иономера и методикой
анализа биологических сред.
УСЛОВИЯ ИЗМЕРЕНИЙ
При подготовке проб к анализу и приготовлении растворов
соблюдают следующие условия:
- температура воздуха (20 +/- 10) -С;
- атмосферное давление 630 - 800 мм рт. ст.;
- влажность воздуха - не более 80% при температуре 25 -С.
Выполнение измерений на иономере проводят в условиях,
рекомендуемых технической документацией по прибору.
ПОДГОТОВКА К ВЫПОЛНЕНИЮ ИЗМЕРЕНИЙ
Перед выполнением измерений должны быть проведены следующие
работы: приготовление растворов и реактивов, подготовка иономера к
работе, установление градуировочной характеристики.
Приготовление растворов и реактивов
Буферный раствор (рН 5,5). 58,5 г хлорида натрия NaCl, 0,36 г
цитрата натрия Nа С Н О х 5Н О, 102 г ацетата натрия трехводного
3 6 5 7 2
СН СООNа х 3Н О переносят в мерную колбу вместимостью 1000 куб.
3 2
см, растворяют в небольшом количестве дистиллированной воды и
добавляют 14,4 куб. см уксусной кислоты. Раствор перемешивают и
доводят дистиллированной водой до метки. Хранят в полиэтиленовой
посуде не более 1 мес.
Насыщенный раствор хлорида калия. 60 г хлорида калия
растворяют в 200 куб. см дистиллированной воды при температуре 50
- 60 -С. После охлаждения используют раствор над осадком для
заполнения вспомогательного электрода.
Приготовление градуировочных растворов
-1
Раствор фторида натрия 1 х 10 моль/куб. дм (pF = 1,0).
Раствор готовят из стандартного образца фторид-ионов в
соответствии с инструкцией по его применению или 1,0497 г фторида
натрия, предварительно высушенного при 110 -С в течение 2 ч,
растворяют в мерной колбе вместимостью 250 куб. см, доводят
дистиллированной водой до метки и перемешивают.
-2
Раствор фторида натрия 1 х 10 моль/куб. дм (pF = 2,0).
Отбирают 10 куб. см раствора фторида натрия с концентрацией ионов
-1
фтора 1 х 10 моль/куб. дм в мерную колбу вместимостью 100 куб.
см, доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают.
-3
Раствор фторида натрия 1 х 10 моль/куб. дм (pF = 3,0).
Отбирают 10 куб. см раствора фторида натрия с концентрацией ионов
-2
фтора 1 х 10 моль/куб. дм в мерную колбу вместимостью 100 куб.
см, доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают.
-4
Раствор фторида натрия 1 х 10 моль/куб. дм (pF = 4,0).
Отбирают 10 куб. см раствора фторида натрия с концентрацией ионов
-3
фтора 1 х 10 моль/куб. дм в мерную колбу вместимостью 100 куб.
см, доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают.
-5
Раствор фторида натрия 6 х 10 моль/куб. дм (pF = 4,2).
Отбирают 6 куб. см раствора фторида натрия с концентрацией ионов
-3
фтора 1 х 10 моль/куб. дм в мерную колбу вместимостью 100 куб.
см, доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают.
-5
Раствор фторида натрия 2 х 10 моль/куб. дм (pF = 4,7).
Отбирают 20 куб. см раствора фторида натрия с концентрацией ионов
-4
фтора 1 х 10 моль/куб. дм в мерную колбу вместимостью 100 куб.
см, доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают.
-5
Раствор фторида натрия 1 х 10 моль/куб. дм (pF = 5,0).
Отбирают 10 куб. см раствора фторида натрия с концентрацией ионов
-4
фтора 1 х 10 моль/куб. дм в мерную колбу вместимостью 100 куб.
см, доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают.
Градуировочные растворы фторида натрия с концентрацией ионов
-1 -2
фтора 1 х 10 - 1 х 10 моль/куб. дм хранят в полиэтиленовой
посуде не более 1 месяца, растворы с концентрацией ионов фтора
-3 -5
1 х 10 - 1 х 10 моль/куб. дм готовят непосредственно перед
использованием.
Подготовка прибора, измерительного
и вспомогательного электродов к работе
Подготовку прибора, измерительного и вспомогательного
электродов к работе осуществляют в соответствии с инструкцией по
их эксплуатации.
Установление градуировочной зависимости
В стаканы вместимостью 50 куб. см вносят по 15 куб. см
-5 -5
растворов фторида натрия с концентрацией 1 х 10 ; 2 х 10 ; 6 х
-5 -4 -3
10 ; 1 х 10 ; 1 х 10 моль/куб. дм и добавляют по 15 куб. см
буферного раствора. Стаканы устанавливают на магнитную мешалку,
погружают в раствор электроды и проводят измерение потенциала в
градуировочных растворах от меньшей концентрации фторид-ионов (1 х
-5 -3
10 моль/куб. дм) к большей (1 х 10 моль/куб. дм). Глубина
погружения электродов и скорость перемешивания должна быть
одинаковыми во всех измерениях. Показания прибора записывают после
установления постоянного значения потенциала.
Для каждой концентрации градуировочного раствора проводят по 3
параллельных измерения потенциала и за результат принимают среднее
арифметическое. Градуировочную зависимость строят в координатах:
значения pF градуировочных растворов (отрицательный логарифм
_
концентрации ионов фтора -lg [F ], моль/куб. дм) - соответствующие
им значения потенциала, мВ.
Градуировочную зависимость проверяют 1 раз в месяц по
-5
концентрации ионов фтора 1 х 10 моль/куб. дм, при замене
измерительного или вспомогательного электродов устанавливают новую
градуировочную зависимость.
Отбор и хранение проб
Отобранные пробы объемом 100 куб. см хранят в полиэтиленовой
посуде, не консервируют. Хранят в холодильнике не более 3 суток.
ВЫПОЛНЕНИЕ ИЗМЕРЕНИЙ
15 куб. см анализируемой пробы (мочи) вносят в стакан
вместимостью 50 куб. см, приливают 15 куб. см буферного раствора,
перемешивают и выдерживают 15 мин., замеряют рН исследуемого
раствора, измерения проводят при рН 6,5 - 7,5. Стакан
устанавливают на магнитную мешалку, погружают в раствор электроды,
ожидают установления равновесного значения потенциала и записывают
показания прибора. После окончания измерения потенциала в
анализируемой пробе электроды отмывают дистиллированной водой.
Отмывка электродов происходит достаточно быстро при трехкратной
замене дистиллированной воды.
ВЫЧИСЛЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ
Значения pF в анализируемых пробах находят по градуировочной
зависимости. Концентрацию фторидов (мг/куб. дм) рассчитывают по
следующим соотношениям:
Таблица
ПЕРЕСЧЕТ ЗНАЧЕНИЙ pF В КОНЦЕНТРАЦИЮ ИОНОВ ФТОРА В МОЧЕ
-----T----------T----T-----------T----T----------T----T----------¬
¦ рF ¦ С, ¦ pF ¦ С, ¦ pF ¦ С, ¦ pF ¦ С, ¦
¦ ¦мг/куб. дм¦ ¦мг/куб. дм ¦ ¦мг/куб. дм¦ ¦мг/куб. дм¦
+----+----------+----+-----------+----+----------+----+----------+
¦4,00¦1,89 ¦4,25¦1,09 ¦4,50¦0,60 ¦4,75¦0,34 ¦
+----+----------+----+-----------+----+----------+----+----------+
¦4,01¦1,85 ¦4,26¦1,04 ¦4,51¦0,58 ¦4,76¦0,33 ¦
+----+----------+----+-----------+----+----------+----+----------+
¦4,02¦1,81 ¦4,27¦1,01 ¦4,52¦0,57 ¦4,77¦0,32 ¦
+----+----------+----+-----------+----+----------+----+----------+
¦4,03¦1,77 ¦4,28¦0,99 ¦4,53¦0,56 ¦4,78¦0,32 ¦
+----+----------+----+-----------+----+----------+----+----------+
¦4,04¦1,73 ¦4,29¦0,97 ¦4,54¦0,54 ¦4,79¦0,31 ¦
+----+----------+----+-----------+----+----------+----+----------+
¦4,05¦1,69 ¦4,30¦0,95 ¦4,55¦0,53 ¦4,80¦0,30 ¦
+----+----------+----+-----------+----+----------+----+----------+
¦4,07¦1,61 ¦4,32¦0,90 ¦4,57¦0,51 ¦4,82¦0,29 ¦
+----+----------+----+-----------+----+----------+----+----------+
¦4,08¦1,57 ¦4,33¦0,88 ¦4,58¦0,49 ¦4,83¦0,29 ¦
+----+----------+----+-----------+----+----------+----+----------+
¦4,09¦1,54 ¦4,34¦0,86 ¦4,59¦0,48 ¦4,84¦0,27 ¦
+----+----------+----+-----------+----+----------+----+----------+
¦4,10¦1,50 ¦4,35¦0,84 ¦4,60¦0,47 ¦4,85¦0,27 ¦
+----+----------+----+-----------+----+----------+----+----------+
¦4,11¦1,47 ¦4,36¦0,82 ¦4,61¦0,46 ¦4,86¦0,26 ¦
+----+----------+----+-----------+----+----------+----+----------+
¦4,12¦1,44 ¦4,37¦0,81 ¦4,62¦0,45 ¦4,87¦0,26 ¦
+----+----------+----+-----------+----+----------+----+----------+
¦4,13¦1,40 ¦4,38¦0,79 ¦4,63¦0,44 ¦4,88¦0,25 ¦
+----+----------+----+-----------+----+----------+----+----------+
¦4,14¦1,37 ¦4,39¦0,77 ¦4,64¦0,43 ¦4,89¦0,24 ¦
+----+----------+----+-----------+----+----------+----+----------+
¦4,15¦1,34 ¦4,40¦0,75 ¦4,65¦0,42 ¦4,90¦0,24 ¦
+----+----------+----+-----------+----+----------+----+----------+
¦4,16¦1,31 ¦4,41¦0,73 ¦4,66¦0,41 ¦4,91¦0,23 ¦
+----+----------+----+-----------+----+----------+----+----------+
¦4,17¦1,28 ¦4,42¦0,72 ¦4,67¦0,41 ¦4,92¦0,23 ¦
+----+----------+----+-----------+----+----------+----+----------+
¦4,18¦1,25 ¦4,43¦0,70 ¦4,68¦0,40 ¦4,93¦0,22 ¦
+----+----------+----+-----------+----+----------+----+----------+
¦4,19¦1,22 ¦4,44¦0,68 ¦4,69¦0,39 ¦4,94¦0,22 ¦
+----+----------+----+-----------+----+----------+----+----------+
¦4,20¦1,19 ¦4,45¦0,67 ¦4,70¦0,38 ¦4,95¦0,21 ¦
+----+----------+----+-----------+----+----------+----+----------+
¦4,21¦1,17 ¦4,46¦0,65 ¦4,71¦0,37 ¦4,96¦0,21 ¦
+----+----------+----+-----------+----+----------+----+----------+
¦4,22¦1,14 ¦4,47¦0,64 ¦4,72¦0,36 ¦4,97¦0,20 ¦
+----+----------+----+-----------+----+----------+----+----------+
¦4,23¦1,11 ¦4,48¦0,62 ¦4,73¦0,35 ¦4,98¦0,20 ¦
+----+----------+----+-----------+----+----------+----+----------+
¦4,24¦1,09 ¦4,49¦0,61 ¦4,74¦0,34 ¦4,99¦0,19 ¦
L----+----------+----+-----------+----+----------+----+-----------
_ -pF -pF
pF = -lg [F ], С F = 10 моль/куб. дм, С F = 10 х 18,99 х
3
10 мг/куб. дм, или находят из таблицы для значений pF в диапазоне
4 - 5. Для перевода в мг/куб. дм значений pF в диапазоне 3 - 4
увеличивают табличные значения в 10 раз. Например, pF, равный
4,46, соответствует 0,65 мг/куб. дм, pF, равный 3,46,
соответствует 6,5 мг/куб. дм.
ВНУТРЕННИЙ ОПЕРАТИВНЫЙ КОНТРОЛЬ
Внутренний оперативный контроль качества результатов
контрольного химического анализа (сходимость, воспроизводимость,
точность) осуществляют с целью получения оперативной информации о
качестве анализов и принятия при необходимости оперативных мер по
его повышению (МИ 2335-95).
Оперативный контроль сходимости
Периодичность контроля сходимости измерений зависит от
количества рабочих измерений (2 параллельные пробы). Отбирают 2
пробы мочи и каждую из них анализируют в точном соответствии с
прописью методики.
Результаты признаются удовлетворительными, если выполняется
условие:
|С - С | <= 0,01d х С ,
1 2 ср
где:
С и С - результаты анализа 1 и 2 проб;
1 2
d - допустимое расхождение между двумя результатами одной и
той же пробы (d = 42%);
С - среднее значение между двумя определениями.
ср
Оперативный контроль точности
Периодичность контроля погрешности измерений зависит от
количества рабочих измерений за контролируемый период и
определяется планами контроля.
Образцами для контроля являются представительные пробы
биосред, к которым делаются добавки в виде раствора. Отбирают 2
пробы и к одной из них делают добавку в виде раствора таким
образом, чтобы их содержание увеличилось по сравнению с исходным
на 50 - 150%. Каждую пробу анализируют в точном соответствии с
прописью методики и получают результат анализа исходной рабочей
пробы Х и рабочей пробы с добавкой Х'. Результаты анализа исходной
рабочей пробы Х и рабочей пробы с добавкой Х' получают не по
возможности, а в одинаковых условиях, т.е. их получает один
аналитик с использованием одного набора мерной посуды, одной
партии реактивов и т.д.
Результаты контроля признаются удовлетворительными, если
выполняется условие:
|Х' - Х - С| < К ,
Д
где:
С - добавка к пробе в виде раствора с концентрацией,
мкг/куб. см;
К - норматив оперативного контроля погрешности, мкг/куб. см.
Д
При внешнем контроле (Р = 0,95) принимают:
_________________
/ 2 2
К = \/ДЕЛЬТА + ДЕЛЬТА ,
Д Х' Х
2 2
где ДЕЛЬТА и ДЕЛЬТА - характеристики погрешностей для
Х' Х
исходной пробы и пробы с добавкой, мкг/куб. см.
ДЕЛЬТА = 0,165 х Х' и ДЕЛЬТА = 0,165 х Х.
Х' Х
При внутрилабораторном контроле (Р = 0,90) принимают, что:
К' = 0,84 х К .
Д Д
При превышении оперативного контроля погрешности эксперимент
повторяют. При повторном превышении указанного норматива выясняют
причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля, и
их устраняют.
|
