Утверждаю
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации
Г.Г.ОНИЩЕНКО
30 декабря 1999 года
Дата введения:
с момента утверждения
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИИ ВЕРАПАМИЛА
[5(3,4-ДИМЕТОКСИФЕНИЛЭТИЛ)-МЕТИЛАМИНО-2(3,4-
ДИМЕТОКСИФЕНИЛ)-2-ИЗОПРОПИЛВАЛЕРОНИТРИЛ ГИДРОХЛОРИД]
В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
МУК 4.1.816-99
Методические указания подготовлены коллективом специалистов в
рамках Проблемной Комиссии "Научные основы гигиены труда и
профпатологии". Утверждены Первым заместителем Министра
здравоохранения Российской Федерации, Председателем Комиссии по
государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию,
Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации
Г.Г. Онищенко в декабре 1999 г.
Методические указания по измерению концентраций вредных
веществ в воздухе рабочей зоны (сборник 35) разработаны с целью
обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных
веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и
ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) -
санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при
осуществлении санитарного контроля.
Методические указания разработаны и подготовлены в
соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ "Воздух рабочей
зоны. Общие санитарно-гигиенические требования".
Методики выполнены с использованием современных методов
исследования, метрологически аттестованы и дают возможность
контролировать концентрации химических веществ на уровне и меньше
их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в ГН
2.2.5.686-98 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных
веществ в воздухе рабочей зоны" и ГН 2.2.5.687-98 "Ориентировочные
безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе
рабочей зоны".
(Структурная формула не приводится)
С Н N О , НСl М.м. 491,07
27 38 2 4
Верапамил - кристаллическое вещество белого цвета, без запаха.
Растворим в воде, этаноле, хлороформе, не растворим в эфире.
Температура плавления 142 - 143 -С. В воздухе находится в виде
аэрозоля.
Верапамил обладает чрезвычайно сильным раздражающим действием,
оказывает влияние на зрение.
ОБУВ в воздухе - 0,2 мг/куб. м.
Характеристика метода
Определение основано на использовании высокоэффективной
жидкостной хроматографии с применением спектрофотометрического
детектора.
Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.
Нижний предел измерения - 0,008 мкг в анализируемой пробе
раствора (1 мкл).
Нижний предел измерения в воздухе - 0,1 мг/куб. м (при отборе
80 л воздуха).
Диапазон определяемых концентраций - 0,1 - 1,25 мг/куб. м.
Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 23,5%.
Определению верапамила не мешают бензол, толуол, ксилолы,
кумол, анилин.
Длительность анализа, включая отбор проб, 2 часа.
Реактивы, растворы и материалы
Верапамил, содержание основного вещества 99,5%.
Раствор верапамила в дистиллированной воде, 1 мг/мл.
Этанол 96-, ГОСТ 5962-67.
Ацетонитрил для жидкостной хроматографии, ОП-3, ос.ч., ТУ
6-09-14-2167-84.
Аммония ацетат, х.ч., ГОСТ 3117-68.
0,1 М раствор аммония ацетата (в 1 л дистиллированной воды
растворяется 7,7083 г аммония ацетата).
Элюент - ацетонитрил: 0,1 М аммония ацетат (85:15).
Фильтры АФА-ВП-40, ТУ 95.7181-76.
Приборы, аппаратура и посуда
Хроматограф жидкостный микроколоночный "Милихром" (ПО
"Научприбор", г. Орел).
Аппарат для встряхивания пробирок АВ-30С, ТУ 61-1.24-51-78.
Аспирационное устройство.
Испаритель вакуумный ИР-1М, ТУ-25-11-917-76.
Пробирки ПГКШ-5, ГОСТ 1770-74.
Пикнометр ПЖ 2-25-КШ 7/16, ГОСТ 22254-77Е.
Пипетки вместимостью 1; 2; 5 мл, ГОСТ 20292-74 КЛО.
Фильтродержатель с мембранным капроновым фильтром (25 мм; 0,2
мкм; МО КНПО "Диагностикум").
Металлическая колонка 80 х 2 мм (заполнена сорбентом Силасорб
SРН С , 5 мкм).
18
Отбор пробы воздуха
Воздух с объемным расходом 5 л/мин. аспирирует через фильтр
АФА-ВП-40, помещенный в фильтродержателе (срок хранения отобранных
проб в темном прохладном месте - до 5 дней). Для определения 1/2
ОБУВ достаточно отобрать 80 л воздуха.
Подготовка к измерению
Разбавлением исходного стандартного раствора (1 мг/мл)
готовятся градуировочные растворы с концентрацией 8 - 100 мкг/мл.
Срок хранения растворов в темном прохладном месте - 2 недели.
По 1 мкл каждого градуировочного раствора вводят в хроматограф.
Калибровочный график строится в координатах - по оси абсцисс -
количество вещества в анализируемой пробе (мкг), по оси ординат -
площадь пика (кв. мм). Значения площадей пиков определяются по 7
измерениям. Градуировочный график строят каждый раз после
приготовления новой серии градуировочных растворов и проверяют его
перед исследованием проб воздуха.
Условия хроматографирования градуировочных смесей и
анализируемых проб:
Адсорбент: Силасорб SPH С (5 мкм).
18
Элюент: смесь 0,1 М раствора аммония ацетата и ацетонитрила в
соотношении 15:85.
Скорость подачи элюента - 100 мкл/мин.
Длина волны детекции - 278 нм.
Диапазон чувствительности детектора - 0,4 А.
Чувствительность шкалы электрометра - 50 мв.
Скорость движения диаграммной ленты - 180 мм/час.
Время удерживания верапамила - 3 мин. 32 сек.
Проведение измерения
Фильтр с пробой помещают в пробирку с 3 мл этилового спирта и
встряхивают 5 минут. Раствор декантируют, фильтр еще два раза
встряхивают с 3 мл этанола. Объединенный спиртовой экстракт
упаривают на вакуумном испарителе до 1 мл, фильтруют через фильтр
диаметром пор 0,2 мкм и исследуют на жидкостном хроматографе. 1
мкл полученного раствора вводят в хроматограф аналогично
градуировочным растворам.
Количественное определение верапамила в хроматографируемом
растворе проводят по предварительно построенному градуировочному
графику.
Расчет концентрации
Концентрацию вещества в воздухе С, мг/куб. м, рассчитывают по
формуле:
а х б
С = -----,
в х V
где:
а - содержание вещества по калибровочному графику, мкг;
б - объем пробы, взятый для анализа, мл;
в - общий объем пробы, мл;
V - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к
нормальным условиям (л) (см. Приложение 1).
Приложение 1
Приведение объема воздуха к стандартным условиям (температура
20 -С и давление 760 мм рт. ст.) проводят по формуле:
V (273 + 20) х Р
t
V = ------------------,
20 (273 + t) х 101,33
где:
V - объем воздуха, отобранный для анализа, л;
t
Р - барометрическое давление, кПа (101,33 кПа = 760
мм рт. ст.);
t - температура воздуха в месте отбора пробы, -С.
Для удобства расчета V следует пользоваться таблицей
20
коэффициентов (Приложение 2). Для приведения воздуха к стандартным
условиям надо умножить V на соответствующий коэффициент.
t
Приложение 2
КОЭФФИЦИЕНТЫ ДЛЯ ПРИВЕДЕНИЯ ОБЪЕМА
ВОЗДУХА К СТАНДАРТНЫМ УСЛОВИЯМ
----T--------------------------------------------------------------------------¬
¦-С ¦ Давление Р, кПа/мм рт. ст. ¦
¦ +------T------T------T------T------T-------T-------T-------T-------T-------+
¦ ¦97,33/¦97,86/¦98,4/ ¦98,93/¦99,46/¦100/750¦100,53/¦101,06/¦101,33/¦101,86/¦
¦ ¦ 730 ¦ 734 ¦ 738 ¦ 742 ¦ 746 ¦ ¦ 754 ¦ 758 ¦ 760 ¦ 764 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦-30¦1,1582¦1,1646¦1,1709¦1,1772¦1,1836¦1,1899 ¦1,1963 ¦1,2026 ¦1,2058 ¦1,2122 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦-26¦1,1393¦1,1456¦1,1519¦1,1581¦1,1644¦1,1705 ¦1,1768 ¦1,1831 ¦1,1862 ¦1,1925 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦-22¦1,1212¦1,1274¦1,1336¦1,1396¦1,1458¦1,1519 ¦1,1581 ¦1,1643 ¦1,1673 ¦1,1735 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦-18¦1,1036¦1,1097¦1,1158¦1,1218¦1,1278¦1,1338 ¦1,1399 ¦1,1460 ¦1,1490 ¦1,1551 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦-14¦1,0866¦1,0926¦1,0986¦1,1045¦1,1105¦1,1164 ¦1,1224 ¦1,1284 ¦1,1313 ¦1,1373 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦-10¦1,0701¦1,0760¦1,0819¦1,0877¦1,0986¦1,0994 ¦1,1053 ¦1,1112 ¦1,1141 ¦1,1200 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦-6 ¦1,0540¦1,0599¦1,0657¦1,0714¦1,0772¦1,0829 ¦1,0887 ¦1,0945 ¦1,0974 ¦1,1032 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦-2 ¦1,0385¦1,0442¦1,0499¦1,0556¦1,0613¦1,0669 ¦1,0726 ¦1,0784 ¦1,0812 ¦1,0869 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦0 ¦1,0309¦1,0366¦1,0423¦1,0477¦1,0535¦1,0591 ¦1,0648 ¦1,0705 ¦1,0733 ¦1,0789 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦+2 ¦1,0234¦1,0291¦1,0347¦1,0402¦1,0459¦1,0514 ¦1,0571 ¦1,0627 ¦1,0655 ¦1,0712 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦+6 ¦1,0087¦1,0143¦1,0198¦1,0253¦1,0309¦1,0363 ¦1,0419 ¦1,0475 ¦1,0502 ¦1,0557 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦+10¦0,9944¦0,9999¦1,0054¦1,0108¦1,0162¦1,0216 ¦1,0272 ¦1,0326 ¦1,0353 ¦1,0407 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦+14¦0,9806¦0,9860¦0,9914¦0,9967¦1,0027¦1,0074 ¦1,0128 ¦1,0183 ¦1,0209 ¦1,0263 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦+18¦0,9671¦0,9725¦0,9878¦0,9880¦0,9884¦0,9936 ¦0,9989 ¦1,0043 ¦1,0069 ¦1,0122 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦+20¦0,9605¦0,9658¦0,9711¦0,9783¦0,9816¦0,9868 ¦0,9921 ¦0,9974 ¦1,0000 ¦1,0053 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦+22¦0,9539¦0,9592¦0,9645¦0,9696¦0,9749¦0,9800 ¦0,9853 ¦0,9906 ¦0,9932 ¦0,9985 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦+24¦0,9475¦0,9527¦0,9579¦0,9631¦0,9683¦0,9735 ¦0,9787 ¦0,9839 ¦0,9865 ¦0,9917 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦+26¦0,9412¦0,9464¦0,9516¦0,9566¦0,9618¦0,9669 ¦0,9721 ¦0,9773 ¦0,9799 ¦0,9851 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦+28¦0,9349¦0,9401¦0,9453¦0,9503¦0,9555¦0,9605 ¦0,9658 ¦0,9707 ¦0,9734 ¦0,9785 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦+30¦0,9288¦0,9339¦0,9391¦0,9440¦0,9432¦0,9542 ¦0,9594 ¦0,9645 ¦0,9670 ¦0,9723 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦+34¦0,9167¦0,9218¦0,9268¦0,9318¦0,9368¦0,9418 ¦0,9468 ¦0,9519 ¦0,9544 ¦0,9595 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦+38¦0,9049¦0,9099¦0,9149¦0,9199¦0,9248¦0,9297 ¦0,9347 ¦0,9397 ¦0,9421 ¦0,9471 ¦
L---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+--------
|
