Утверждаю
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации
Г.Г.ОНИЩЕНКО
31 декабря 1999 года
Дата введения:
с момента утверждения
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ 19-НОРТЕСТОСТЕРОНА В ВОЗДУХЕ
РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ
ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
МУК 4.1.846-99
Методические указания подготовлены коллективом специалистов в
рамках Проблемной Комиссии "Научные основы гигиены труда и
профпатологии". Утверждены Первым заместителем Министра
здравоохранения Российской Федерации, Председателем Комиссии по
государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию,
Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации
Г.Г. Онищенко в декабре 1999 г.
Методические указания по измерению концентраций вредных
веществ в воздухе рабочей зоны (сборник 35) разработаны с целью
обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных
веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и
ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) -
санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при
осуществлении санитарного контроля.
Методические указания разработаны и подготовлены в
соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ "Воздух рабочей
зоны. Общие санитарно-гигиенические требования".
Методики выполнены с использованием современных методов
исследования, метрологически аттестованы и дают возможность
контролировать концентрации химических веществ на уровне и меньше
их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в ГН
2.2.5.686-98 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных
веществ в воздухе рабочей зоны" и ГН 2.2.5.687-98 "Ориентировочные
безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе
рабочей зоны".
(Структурная формула не приводится)
М. м. 274,41
19-нортестостерон - белый с кремоватым оттенком
кристаллический порошок с температурой плавления 119 - 123 -С. Не
растворим в воде, растворим в бензоле, ацетоне, спирте.
В воздухе находится в виде аэрозоля.
19-нортестостерон - малотоксичное соединение при
внутрижелудочном введении. Оказывает выраженное анаболическое и
слабое андрогенное действие. Проникает через кожу. 1 класс
опасности.
ПДК в воздухе - 0,005 мг/куб. м.
Характеристика метода
Определение основано на применении высокоэффективной
жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора.
Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.
Нижний предел измерения 19-нортестостерона в
хроматографируемом объеме (20 мкл) - 0,008 мкг.
Нижний предел измерения вещества в воздухе - 0,0025 мг/куб. м
(при отборе 80 л воздуха).
Диапазон измеряемых концентраций вещества в воздухе от 0,0025
до 0,025 мг/куб. м.
Измерению не мешают метанол, бензол, эфир, ацетон, хлороформ.
Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 13%.
Время выполнения измерения, включая отбор проб, 1 час 40 мин.
Приборы, аппаратура, посуда
Жидкостный хроматограф с УФ-детектором.
Хроматографическая колонка из нержавеющей стали длиной 0,25 м,
с внутренним диаметром 8,2 мм, заполненная силикагелем "для
хроматографии" (4,0 - 5,0 мкм), диаметр пор 6 - 60 нм.
Фильтродержатель.
Аспирационное устройство.
Колбы мерные вместимостью 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74.
Пипетки вместимостью 1, 5, 10 мл, ГОСТ 23932-79.
Пробирки с пришлифованными пробками вместимостью 10 мл, ГОСТ
10515-75.
Стаканы химические вместимостью 50 мл, ГОСТ 10394-72.
Колбы грушевидные вместимостью 25 мл, ГОСТ 1770-74Е.
Вакуумная установка.
Реактивы, растворы и материалы
19-нортестостерон.
Спирт метиловый, х.ч., ГОСТ 6295-75.
Элюент: метиловый спирт дегазируют пропусканием гелия в
течение 10 мин.
Стандартный раствор N 1 с концентрацией 500 мкг/мл
19-нортестостерона готовят растворением 0,050 г вещества в спирте
метиловом в мерной колбе вместимостью 100 мл. Раствор устойчив в
течение 10 дней.
Градуировочные растворы с концентрацией от 0,4 до 4,0 мкг/мл
готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1
спиртом метиловым. Растворы устойчивы в течение суток.
Фильтры АФА-ВП-10, ТУ 85-743-80.
Отбор пробы воздуха
Воздух с объемным расходом 5 л/мин. аспирируют через фильтр
АФА-ВП-10, помещенный в фильтродержатель. Для измерения 0,5 ПДК
следует отобрать 80 л воздуха. Срок хранения проб - в течение 12
суток.
Подготовка к измерению
Хроматографическая колонка промышленного изготовления.
Инжектируют в колонку хроматографа по 20 мкл градуировочных
растворов 19-нортестостерона.
Условия хроматографирования градуировочных смесей и
анализируемых проб:
Температура термостата колонки +50 -С
Скорость подачи элюента (метанол) 0,7 мл/мин.
Длина волны УФ-детектора 280 нм
Время удерживания 19-нортестостерона 14 мин. 48 сек.
Максимальный объем вводимой пробы 20 мкл
Скорость движения диаграммной ленты 6 см/час.
На полученной хроматограмме измеряют площади пиков и строят
градуировочную кривую, выражающую зависимость площади пиков (кв.
мм) от содержания вещества в хроматографируемом объеме пробы
(мкг).
Построение градуировочного графика необходимо проводить не
менее чем по 6 точкам, выполняя 5 параллельных измерений для
каждой концентрации. Проверку градуировочного графика следует
проводить при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в
месяц.
Проведение измерения
Фильтр с отобранной пробой помещают в бюкс, заливают 10 мл
метанола. Отставляют на 30 мин., периодически помешивая стеклянной
палочкой для лучшего растворения вещества. Экстракцию повторяют
дважды. Степень десорбции вещества с фильтра составляет 98,7%.
Экстракты объединяют и упаривают на роторном испарителе при
температуре 70 -С до сухого остатка. Сухой остаток растворяют в
0,5 мл метанола. Для анализа отбирают 0,3 мл раствора и с помощью
шприца вводят в хроматограф 20 мкл раствора через инжекторное
устройство.
Количественное определение содержания вещества в анализируемой
пробе проводят по предварительно построенному градуировочному
графику.
Расчет концентрации
Концентрацию 19-нортестостерона в воздухе "С" (мг/куб. м)
вычисляют по формуле:
а х В
С = -----,
б х V
где:
а - содержание вещества в хроматографируемом объеме пробы,
найденное по градуировочному графику, мкг;
В - общий объем раствора пробы, мл;
б - объем раствора пробы, взятый для хроматографирования, мл;
V - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к
стандартным условиям, л (см. Приложение 1).
Приложение 1
Приведение объема воздуха к стандартным условиям (температура
20 -С и давление 760 мм рт. ст.) проводят по формуле:
V (273 + 20) х Р
t
V = ------------------,
20 (273 + t) х 101,33
где:
V - объем воздуха, отобранный для анализа, л;
t
Р - барометрическое давление, кПа (101,33 кПа = 760
мм рт. ст.);
t - температура воздуха в месте отбора пробы, -С.
Для удобства расчета V следует пользоваться таблицей
20
коэффициентов (Приложение 2). Для приведения воздуха к стандартным
условиям надо умножить V на соответствующий коэффициент.
t
Приложение 2
КОЭФФИЦИЕНТЫ ДЛЯ ПРИВЕДЕНИЯ ОБЪЕМА
ВОЗДУХА К СТАНДАРТНЫМ УСЛОВИЯМ
----T--------------------------------------------------------------------------¬
¦-С ¦ Давление Р, кПа/мм рт. ст. ¦
¦ +------T------T------T------T------T-------T-------T-------T-------T-------+
¦ ¦97,33/¦97,86/¦98,4/ ¦98,93/¦99,46/¦100/750¦100,53/¦101,06/¦101,33/¦101,86/¦
¦ ¦ 730 ¦ 734 ¦ 738 ¦ 742 ¦ 746 ¦ ¦ 754 ¦ 758 ¦ 760 ¦ 764 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦-30¦1,1582¦1,1646¦1,1709¦1,1772¦1,1836¦1,1899 ¦1,1963 ¦1,2026 ¦1,2058 ¦1,2122 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦-26¦1,1393¦1,1456¦1,1519¦1,1581¦1,1644¦1,1705 ¦1,1768 ¦1,1831 ¦1,1862 ¦1,1925 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦-22¦1,1212¦1,1274¦1,1336¦1,1396¦1,1458¦1,1519 ¦1,1581 ¦1,1643 ¦1,1673 ¦1,1735 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦-18¦1,1036¦1,1097¦1,1158¦1,1218¦1,1278¦1,1338 ¦1,1399 ¦1,1460 ¦1,1490 ¦1,1551 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦-14¦1,0866¦1,0926¦1,0986¦1,1045¦1,1105¦1,1164 ¦1,1224 ¦1,1284 ¦1,1313 ¦1,1373 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦-10¦1,0701¦1,0760¦1,0819¦1,0877¦1,0986¦1,0994 ¦1,1053 ¦1,1112 ¦1,1141 ¦1,1200 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦-6 ¦1,0540¦1,0599¦1,0657¦1,0714¦1,0772¦1,0829 ¦1,0887 ¦1,0945 ¦1,0974 ¦1,1032 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦-2 ¦1,0385¦1,0442¦1,0499¦1,0556¦1,0613¦1,0669 ¦1,0726 ¦1,0784 ¦1,0812 ¦1,0869 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦0 ¦1,0309¦1,0366¦1,0423¦1,0477¦1,0535¦1,0591 ¦1,0648 ¦1,0705 ¦1,0733 ¦1,0789 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦+2 ¦1,0234¦1,0291¦1,0347¦1,0402¦1,0459¦1,0514 ¦1,0571 ¦1,0627 ¦1,0655 ¦1,0712 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦+6 ¦1,0087¦1,0143¦1,0198¦1,0253¦1,0309¦1,0363 ¦1,0419 ¦1,0475 ¦1,0502 ¦1,0557 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦+10¦0,9944¦0,9999¦1,0054¦1,0108¦1,0162¦1,0216 ¦1,0272 ¦1,0326 ¦1,0353 ¦1,0407 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦+14¦0,9806¦0,9860¦0,9914¦0,9967¦1,0027¦1,0074 ¦1,0128 ¦1,0183 ¦1,0209 ¦1,0263 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦+18¦0,9671¦0,9725¦0,9878¦0,9880¦0,9884¦0,9936 ¦0,9989 ¦1,0043 ¦1,0069 ¦1,0122 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦+20¦0,9605¦0,9658¦0,9711¦0,9783¦0,9816¦0,9868 ¦0,9921 ¦0,9974 ¦1,0000 ¦1,0053 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦+22¦0,9539¦0,9592¦0,9645¦0,9696¦0,9749¦0,9800 ¦0,9853 ¦0,9906 ¦0,9932 ¦0,9985 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦+24¦0,9475¦0,9527¦0,9579¦0,9631¦0,9683¦0,9735 ¦0,9787 ¦0,9839 ¦0,9865 ¦0,9917 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦+26¦0,9412¦0,9464¦0,9516¦0,9566¦0,9618¦0,9669 ¦0,9721 ¦0,9773 ¦0,9799 ¦0,9851 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦+28¦0,9349¦0,9401¦0,9453¦0,9503¦0,9555¦0,9605 ¦0,9657 ¦0,9708 ¦0,9734 ¦0,9785 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦+30¦0,9288¦0,9339¦0,9391¦0,9440¦0,9432¦0,9542 ¦0,9594 ¦0,9645 ¦0,9670 ¦0,9723 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦+34¦0,9167¦0,9218¦0,9268¦0,9318¦0,9368¦0,9418 ¦0,9468 ¦0,9519 ¦0,9544 ¦0,9595 ¦
+---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+-------+
¦+38¦0,9049¦0,9099¦0,9149¦0,9199¦0,9248¦0,9297 ¦0,9347 ¦0,9397 ¦0,9421 ¦0,9471 ¦
L---+------+------+------+------+------+-------+-------+-------+-------+--------
|
