Утверждаю
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации,
Первый заместитель
Министра здравоохранения
Российской Федерации
Г.Г.ОНИЩЕНКО
3 марта 2004 года
Дата введения -
1 мая 2004 года
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
АТОМНО-АБСОРБЦИОННОЕ ИЗМЕРЕНИЕ МАССОВЫХ КОНЦЕНТРАЦИЙ
СЕЛЕНА В ЭРИТРОЦИТАХ И ПЛАЗМЕ КРОВИ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
МУК 4.1.1899-04
1. Разработаны: к.х.н. И.Л. Гринштейн, Л.А. Васильева, Л.П.
Полякова (РНЦ "Прикладная химия"), к.х.н. В.П. Ипполитова, к.б.н.
Е.А. Комракова (Нижегородский НИИ гигиены и профпатологии).
2. Подготовлены творческим коллективом специалистов в составе:
Л.М. Безрукавникова, Л.Г. Макеева, Г.В. Муравьева.
3. Рекомендованы к утверждению на совместном заседании группы
Главного эксперта Комиссии по государственному
санитарно-эпидемиологическому нормированию по проблеме
"Лабораторно-инструментальное дело и метрологическое обеспечение"
и методбюро п/секции "Промышленно-санитарная химия" Проблемной
комиссии "Научные основы медицины труда".
4. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному
санитарно-эпидемиологическому нормированию при Министерстве
здравоохранения Российской Федерации.
5. Утверждены Главным государственным санитарным врачом
Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения
Российской Федерации 3 марта 2004 г.
6. Введены в действие с 1 мая 2004 г.
Введение
Методические указания по определению массовых концентраций
химических веществ в биологических средах предназначены для
использования в системе Госсанэпиднадзора России, в лечебных и
научных учреждениях, работающих в области медицины труда,
промышленной экологии и экологии окружающей среды.
Методические указания разработаны с целью обеспечения контроля
за содержанием металлов и химических соединений в крови и моче
людей, подвергающихся неблагоприятному воздействию вредных
производственных и экологических факторов.
В сборнике представлены 5 методик по измерению концентраций 6
металлов и 3 химических соединений в моче и крови. Методики
основаны на использовании атомно-абсорбционных и
газохроматографических методов анализа.
Включенные в сборник Методические указания разработаны в
соответствии с требованиями ГОСТ Р 8.563-96 "Государственная
система единства измерений. Методики выполнения измерений", МИ
2336-95 "Характеристики погрешности и результатов количественного
химического анализа. Алгоритмы оценивания", МИ 2336-96 "Внутренний
контроль качества результатов количественного химического
анализа".
1. Область применения
Методические указания устанавливают количественный
атомно-абсорбционный анализ плазмы (сыворотки) и эритроцитов крови
на содержание селена в диапазоне концентраций 0,001 - 0,02
мкг/куб. см.
2. Характеристика определяемого элемента
Молекулярная масса - 78,96.
Регистрационный номер CAS: 7782-49-2.
Селен - темно-серый, с коричневым оттенком порошок, T 221
пл
-С, T 685,3 -С, плотность 4,79.
кип
При обычной температуре селен устойчив к действию воздуха,
кислорода, воды, концентрированной соляной и разбавленной серной
кислот, хорошо растворяется в концентрированной азотной кислоте. С
фтором, хлором, бромом селен на холоде образует галогениды, с
водородом взаимодействует при температуре 350 - 400 -С, образуя
селеноводород. При сжигании на воздухе или в кислороде образуется
оксид селена (SeO ), последний при растворении в воде дает
2
селенистую кислоту.
Токсикологическая характеристика определяемого элемента
Селен обладает двойственными свойствами, с одной стороны
необходим для жизни, с другой - является токсичным элементом.
Селен выполняет роль катализатора ряда ферментативных реакций,
участвует в реакции окислительно-восстановительных процессов,
является стабилизатором плазматических ядерных и внутриклеточных
мембран, обладает антиокислительными свойствами и в некоторых
биохимических реакциях заменяет витамин Е.
Механизм токсического действия селена связан с замещением серы
в биохимически активных веществах в процессе метаболизма, селен
входит в активный центр глютатионпероксидазы. По характеру
действия соединения селена несколько напоминают соединения
мышьяка, обладают политропным действием. В ряде случаев его
воздействие вызывает изменение ткани зубов, заболевания ногтей,
желудочно-кишечные нарушения, нервные расстройства. Химическая
форма селена может изменяться после контакта с влажными слизистыми
оболочками, с потом. Соединения селена более токсичны, чем
элементарный селен. Диапазон физиологически оптимальных
концентраций селена узок, при уровне ниже минимального предела
отмечается увеличение риска возникновения и развития
кардиологических и ряда онкологических заболеваний, ослабление
антиоксидантной защиты организма. Изменения содержания селена
происходят раньше в плазме (сыворотке), чем в эритроцитах.
Нормальной концентрацией селена в плазме (сыворотке) крови
считается диапазон от 0,053 до 0,105 мкг/куб. см.
3. Погрешность измерений
Методика обеспечивает выполнение измерений массовой
концентрации селена с погрешностью, не превышающей +/- 28%, при
доверительной вероятности 0,95.
4. Метод измерений
Метод основан на минерализации проб плазмы и эритроцитов крови
концентрированной азотной кислотой и пероксидом водорода,
получении летучего гидрида селена, его термическом разложении и
последующем измерении резонансного поглощения линии селена на
атомно-абсорбционном спектрометре.
Нижний предел измерения концентрации селена в минерализате
0,001 мкг/куб. см.
5. Средства измерений, вспомогательные устройства,
материалы и реактивы
5.1. Средства измерения, вспомогательные
устройства и материалы
5.1.1. Атомно-абсорбционный спектрометр КВАНТ-2А, ГКНЖ
30.00.000, ТУ 4434-030-29903757-99, оснащенный гидридной
приставкой ГРГ-107, ГКНЖ 46.00.000 ТУ 4434-030-29903757-99 и
источником излучения для определения селена (лампой полого
катода).
5.1.2. Весы лабораторные ВЛР-200, ГОСТ 24104-88Е.
5.1.3. Колбы мерные 2-25-2; 2-50-2; 2-100-2; 2-200-2; 2-250-2,
ГОСТ 1770-74Е.
5.1.4. Пипетки мерные 4(5)-1-1; 4(5)-1-2; 4(5)-1-5; 4(5)-1-10;
4(5)-1-20, ГОСТ 29227-91.
5.1.5. Пробирки мерные, вместимостью 10 куб. см, ГОСТ
25336-82Е.
5.1.6. Стаканы Н-1-10 ТХС, Н-1-25; Н-1-100, ГОСТ 25336-82Е.
5.1.7. Колба коническая, вместимостью 100 куб. см, ГОСТ
25366-82Е.
5.1.8. Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2; пределы 0 - 200
-С, цена деления 0,1 -С, ГОСТ 215-73Е.
5.1.9. Электроплитка бытовая, ГОСТ 14919-83.
5.1.10. Аналитический реактор для минерализации проб РМП-25,
изготовленный НПО "Метрология" г. Казань (аналитический автоклав),
МУК 4.1.985-00.
5.1.11. Термостат с автоматической регулировкой температуры до
200 -С.
5.1.12. Ацетилен технический, в баллонах, ГОСТ 5457-75.
5.1.13. Аргон газообразный в баллонах, ТУ 21-12-79.
5.1.14. Часовое стекло.
5.1.15. Центрифуга лабораторная клиническая Опн-3, ТУ 5375-
4260-76.
5.2. Реактивы
5.2.1. Вода дистиллированная, ГОСТ 6709-72 или
бидистиллированная.
5.2.2. Натрия гидроксид, ГОСТ 4328-77.
5.2.3. Боргидрид натрия (тетрагидроборат натрия), ТУ
1-92-162-90.
5.2.4. Пероксид водорода о.с.ч., ГОСТ 10929-76.
5.2.5. Стандартный образец состава раствора ионов селена с
массовой концентрацией селена 1,0 мг/куб. см; ГСО 7779-2000.
5.2.6. Кислота азотная о.с.ч., ГОСТ 11125-73.
5.2.7. Кислота соляная о.с.ч., ГОСТ 14261-77.
5.2.8. Гепарин для инъекций, N сертификата соответствия
50-20-70546 от 29.07.02.
5.2.9. Натрия хлорид, ГОСТ 4233-77.
5.2.10. Мочевина, ГОСТ 6691.
Допускается использование других средств измерений,
вспомогательного оборудования, материалов и реактивов с
техническими и метрологическими характеристиками и квалификацией
не хуже приведенных в разделе.
6. Требования безопасности
6.1. При работе с реактивами соблюдают требования
безопасности, установленные для работы с токсичными, едкими и
легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005-88.
6.2. При выполнении измерений с использованием
атомно-абсорбционного спектрометра соблюдают правила
электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и
инструкцией по эксплуатации прибора.
6.3. При работе с газами, находящимися в баллонах под
давлением, необходимо соблюдать "Правила устройства и безопасной
эксплуатации сосудов, работающих под давлением" (ПБ-10-115-96),
утвержденные Постановлением Госгортехнадзора России 18.04.95 N 20
и ГОСТ 12.2.085.
6.4. Реакционный блок ГРГ-107 предохраняют от ударов и резких
толчков, не допускают перекосов сосудов в генераторе.
Неиспользованные растворы боргидрида натрия перед утилизацией
дезактивируют в вытяжном шкафу избыточным объемом 10%-ного
раствора азотной кислоты в толстостенном сосуде объемом 500 куб.
см.
7. Требования к квалификации оператора
К выполнению измерений и обработке результатов допускают лиц с
высшим или среднеспециальным образованием, имеющих опыт работы в
химической лаборатории, овладевших персональным компьютером и
программным обеспечением на уровне пользователя, техникой
эксплуатации пламенно-абсорбционного спектрометра типа "Квант",
генератора ртутно-гидридного ГРГ-107.
8. Условия измерений
8.1. Приготовление растворов и подготовку проб к анализу
проводят в нормальных условиях при температуре воздуха (20 +/- 5)
-С, атмосферном давлении 84 - 106 кПа и относительной влажности
воздуха не более 80%.
9. Подготовка к выполнению измерений
9.1. Отбор, подготовка и хранение проб
Кровь берут из вены в количестве 5 куб. см. В пробирку с
кровью вносят 0,1 куб. см гепарина, перемешивают, центрифугируют
при 3000 об./мин. в течение 10 мин. Отделяют плазму от
эритроцитов. Эритроциты отмывают дважды физиологическим раствором.
Плазму и эритроциты минерализуют отдельно в аналитических
автоклавах по следующей схеме: 1 куб. см плазмы и эритроцитов
помещают в тефлоновые стаканчики автоклава, добавляют по 1,5 см
концентрированной азотной кислоты, через 15 - 20 мин. добавляют 1
куб. см 36%-ного пероксида водорода, закрывают крышкой,
герметизируют в металлическом корпусе. Автоклав помещают в
термостат, выдерживают при T 190 -С 60 мин., вынимают, охлаждают.
В тефлоновый стаканчик добавляют 1,5 куб. см концентрированной
соляной кислоты и нагревают при температуре 95 -С в течение 30
мин., охлаждают и добавляют 0,2 куб. см 10%-ного раствора
мочевины. Для получения "холостой" пробы в тефлоновый стакан
помещают 1 куб. см бидистиллированной воды, 1 каплю гепарина, 1,5
куб. см азотной кислоты, 1 куб. см 36%-ного пероксида водорода и
поступают как описано выше. Объем полученного минерализата плазмы,
эритроцитов, холостой пробы доводят 6 М раствором соляной кислоты
до 10 куб. см. Пробы готовы к измерению. При невозможности
немедленного анализа минерализаты хранят в холодильнике. Срок
хранения 1 месяц.
9.2. Приготовление растворов
9.2.1. Раствор соляной кислоты молярной концентрации 6
моль/куб. дм.
486 куб. см соляной кислоты d = 1,19 г/куб. см помещают в
мерную колбу, вместимостью 1 куб. дм, доводят объем до метки
дистиллированной водой.
9.2.2. Стандартный раствор N 1 с массовой концентрацией селена
50 мкг/куб. см. Готовят из стандартного раствора ионов селена с
массовой концентрацией 1,0 мг/куб. см. Вскрывают ампулу,
содержимое выливают в сухую пробирку, отмеряют пипеткой 5 куб. см,
переносят его в мерную колбу вместимостью 100 куб. см и доводят до
метки 6 М раствором соляной кислоты. Срок хранения 3 месяца.
9.2.3. Стандартный раствор N 2 с массовой концентрацией 0,5
мкг/куб. см. Готовят из раствора N 1. Отбирают 1 куб. см в
коническую колбу, вместимостью 100 куб. см, добавляют 50 куб. см 6
М раствора соляной кислоты, нагревают на плитке в течение 20 - 30
минут, не допуская сильного кипения, переносят полученный раствор
в мерную колбу вместимостью 100 куб. см. Коническую колбу из-под
раствора несколько раз промывают 6 М раствором соляной кислоты,
сливая в мерную колбу. Полученный раствор доводят до метки 6 М
раствором соляной кислоты. Срок хранения 1 месяц.
9.2.4. Стандартный раствор N 3 с массовой концентрацией селена
0,020 мкг/куб. см. Готовят из раствора N 2. Пипеткой переносят 4
куб. см в мерную колбу вместимостью 100 куб. см и доводят до метки
6 М раствором соляной кислоты. Срок хранения 1 день.
9.2.5. Стандартный раствор N 4 с массовой концентрацией селена
0,010 мкг/куб. см. Готовят из раствора N 2. Отбирают пипеткой 2
куб. см в мерную колбу вместимостью 100 куб. см и доводят до метки
6 М раствором соляной кислоты. Срок хранения 1 день.
9.2.6. Стандартный раствор N 5 с массовой концентрацией 0,005
мкг/куб. см. Готовят из раствора N 2. 1 куб. см раствора селена с
концентрацией 0,5 мкг/куб. см переносят в мерную колбу
вместимостью 100 куб. см и доводят до метки 6 М раствором соляной
кислоты. Срок хранения 1 день.
9.2.7. Стандартный раствор N 6 с массовой концентрацией селена
0,002 мкг/куб. см. Готовят из раствора N 3 с массовой
концентрацией селена 0,020 мкг/куб. см. Отбирают пипеткой 10 куб.
см в мерную колбу вместимостью 100 куб. см, доводят 6 М раствором
соляной кислоты до метки.
9.2.8. Стандартный раствор N 7 с массовой концентрацией 0,001
мкг/куб. см. Готовят из раствора N 4 с массовой концентрацией
селена 0,010 мкг/куб. см. Отбирают 10 куб. см в мерную колбу на
100 куб. см и доводят до метки 6 М раствором соляной кислоты.
9.2.9. Раствор гидроксида натрия с массовой долей - 1%.
Готовят растворением 1 г гидроксида натрия в 99 куб. см
бидистиллированной воды.
9.2.10. Раствор боргидрида натрия с массовой долей 1,5%. 1,5 г
боргидрида натрия растворяют в 98,5 99 куб. см 1%-ного раствора
гидроксида натрия. Раствор выдерживают не менее одного часа под
часовым стеклом, переливают в полиэтиленовую банку с крышкой. Срок
хранения 1 - 2 недели.
9.2.11. Раствор натрия хлорида с массовой концентрацией 0,9%
(физиологический раствор). Готовят растворением 0,9 г натрия
хлорида в 99,1 99 куб. см бидистиллированной воды.
9.3. Подготовка к работе спектрометра
и гибридной приставки ГРГ-107
Установить при выключенном приборе спектральную лампу на селен.
Открыть вентиль воздушной магистрали.
Открыть вентиль на баллоне с горючим газом.
Установить с помощью редукторов, необходимое давление для
ацетилена 0,12 - 0,18 Мпа (1,2 - 1,8 атм.); для аргона и воздуха 3
- 4 атм.
Подготовить к работе ртутно-гидридную приставку в соответствии
с руководством по эксплуатации ГКНЖ 46.00.000 РЭ, генератор
ртутно-гидридный ГРГ-107.
Включить компьютер и произвести запуск компьютерной программы.
Включить кнопку "Сеть" и нажать кнопку "Сброс" на передней
панели спектрометра.
С помощью компьютерной программы загрузить выбранную методику
на селен. Программа автоматически установит значения параметров
прибора (токов спектральных ламп, напряжение питания ФЭУ).
После выхода в графический экран добиться максимального
значения интенсивности в канале лампы полого катода селена (за
счет уточнения длины волны, юстировки спектральных ламп).
Оставаясь в графическом экране, произвести, в случае
необходимости, корректировку считанных из методики значений токов
спектральных ламп и напряжения питания ФЭУ.
После корректировки значения сигналов в каналах лампы полого
катода и дейтеревой лампы должны быть близки к 100.
Подать команду на зажигание пламени "поджечь".
Промыть горелку, при горящем пламени опустить капилляр в
промывочный раствор (6 М раствор соляной кислоты) на 1 мин.
Рабочие параметры, устанавливаемые на спектрометре и условия
определения селена для ртутно-гидридного генератора, диапазон
определяемых концентраций представлены в табл. 1.
Таблица 1
РАБОЧИЕ ПАРАМЕТРЫ СПЕКТРОМЕТРА И УСЛОВИЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СЕЛЕНА
--------T------T-------T-------T------T----------T-------T--------T------------¬
¦ Длина ¦Ширина¦Предва-¦Задерж-¦Ре- ¦ Реагент ¦Рабочая¦ Пламя ¦ Диапазон ¦
¦ волны ¦ щели,¦ритель-¦ка, ¦гист- ¦Боргидрид ¦газовая¦ ¦определяемых¦
¦лямбда,¦ мм ¦ный ¦сек. ¦рация,¦ натрия ¦ смесь ¦ ¦концентра- ¦
¦ нм ¦ ¦продув,¦ ¦с ¦ 1,5%-ный ¦ ¦ ¦ций, ¦
¦ ¦ ¦с ¦ ¦ ¦ раствор ¦ ¦ ¦мкг/куб. см ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ куб. см ¦ ¦ ¦ ¦
+-------+------+-------+-------+------+----------+-------+--------+------------+
¦196,0 ¦0,50 ¦20 ¦10 ¦40 - ¦не более ¦аргон -¦воздух -¦0,001 - ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦45 ¦40 куб. см¦воздух ¦ацетилен¦0,020 ¦
L-------+------+-------+-------+------+----------+-------+--------+-------------
9.4. Установление и контроль градуировочной характеристики
Градуировочную характеристику, выражающую зависимость величины
абсорбции от массовой концентрации селена (мкг/куб. см)
устанавливают путем измерения величины абсорбции стандартных
растворов, приготовленных согласно табл. 2.
Таблица 2
УСТАНОВЛЕНИЕ ГРАДУИРОВОЧНОЙ ХАРАКТЕРИСТИКИ
ПРИ ОПРЕДЕЛЕНИИ СЕЛЕНА
-----T--------------------T-----------T-------------T------------¬
¦ N ¦Стандартные растворы¦Стандартный¦ 6 М раствор ¦ Массовая ¦
¦п.п.¦по пп. 9.2.2 - 9.2.5¦ раствор ¦ соляной ¦концентрация¦
¦ ¦ ¦ селена, ¦ кислоты, ¦ селена, ¦
¦ ¦ ¦ куб. см ¦ куб. см ¦мкг/куб. см ¦
+----+--------------------+-----------+-------------+------------+
¦1. ¦Холостая проба ¦0 ¦100 ¦0 ¦
+----+--------------------+-----------+-------------+------------+
¦2. ¦N 4 с массовой ¦10 ¦90 ¦0,001 ¦
¦ ¦концентрацией селена¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦0,01 мкг/куб. см ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦п. 9.2.5 ¦ ¦ ¦ ¦
+----+--------------------+-----------+-------------+------------+
¦3. ¦N 3 с массовой ¦10 ¦90 ¦0,002 ¦
¦ ¦концентрацией селена¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦0,02 мкг/куб. см ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦п. 9.2.4 ¦ ¦ ¦ ¦
+----+--------------------+-----------+-------------+------------+
¦4. ¦N 2 с массовой ¦1 ¦99 ¦0,005 ¦
¦ ¦концентрацией селена¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦0,5 мкг/куб. см ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦п. 9.2.3 ¦ ¦ ¦ ¦
+----+--------------------+-----------+-------------+------------+
¦5. ¦N 2 с массовой ¦2 ¦98 ¦0,010 ¦
¦ ¦концентрацией селена¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦0,5 мкг/куб. см ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦п. 9.2.3 ¦ ¦ ¦ ¦
+----+--------------------+-----------+-------------+------------+
¦6. ¦N 2 с массовой ¦4 ¦96 ¦0,020 ¦
¦ ¦концентрацией селена¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦0,5 мкг/куб. см ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦п. 9.2.3 ¦ ¦ ¦ ¦
L----+--------------------+-----------+-------------+-------------
Замеряют величину абсорбции указанных градуировочных растворов
и холостой пробы по алгоритму программы спектрометра.
В реакционный сосуд "Р" помещают с помощью пипетки 10 куб. см
градуировочного раствора или холостой пробы, устанавливают сосуд в
реакционный блок, проводят измерение.
Проводят по пять параллельных измерений со всеми пятью
указанными градуировочными растворами.
Программа компьютера строит по средним значениям результатов
измерений абсорбции градуировочный график.
Перед каждым началом работы, а также в процессе работы через
10 - 15 измерений уточняют вызванную из памяти компьютера
градуировку по одному или двум растворам.
10. Выполнение измерений
При проведении измерений концентраций селена в пробах
выполняют следующие операции:
- Заполняют сосуд для раствора реагента - раствором боргидрида
натрия, объемом не более 40 куб. см.
- В реакционный сосуд вносят дозированный объем подготовленной
пробы (10 куб. см).
- Оба сосуда устанавливают в соответствующий блок генератора
"ГРГ-107".
- Подают с помощью компьютера команду "измерение".
- Выполняют измерения "холостой" пробы.
При замерах концентраций селена в пробах свыше 0,02 мкг/куб.
см пробы разбавляют.
11. Вычисление результатов измерений
Массовую концентрацию селена в мкг/куб. см в эритроцитах и
плазме (сыворотке) крови вычисляют по формуле:
C = (C - C ) мкг/куб. см,
р х
где:
C - массовая концентрация селена в анализируемой пробе в
мкг/куб. см;
С и С - концентрация селена в анализируемом растворе (после
р х
минерализации) и "холостой пробы", мкг/куб. см.
12. Оформление результатов измерений
Результат количественного анализа представляют в виде C +/-
ДЕЛЬТА мкг/куб. см, P = 0,90, ДЕЛЬТА = 0,283 х C.
13. Контроль погрешности измерений
Таблица 3
РЕЗУЛЬТАТЫ МЕТРОЛОГИЧЕСКОЙ АТТЕСТАЦИИ МЕТОДИКИ КХА
--------------T--------------------------------------------------¬
¦ Диапазон ¦ Наименование метрологической характеристики ¦
¦определяемых +--------------T---------------T-------------------+
¦концентраций ¦характеристика¦ норматив ¦ норматив ¦
¦ селена, ¦ погрешности, ¦ оперативного ¦ оперативного ¦
¦ мкг/куб. см ¦ ДЕЛЬТА, ¦ контроля ¦ контроля ¦
¦ ¦ P = 0,95 ¦погрешности, K,¦ воспроизводимости ¦
¦ ¦ мкг/куб. см ¦m = 2, P = 0,95¦ Д, P = 0,95, ¦
¦ ¦ ¦ мкг/куб. см ¦ m = 2 мкг/куб. см ¦
+-------------+--------------+---------------+-------------------+
¦0,001 - 0,020¦0,283 х C ¦0,40 х C ¦0,00058 + 0,034 C ¦
¦ ¦ ¦ ¦(для плазмы) ¦
¦ ¦ ¦ ¦0,00022 + 0,0577 C ¦
¦ ¦ ¦ ¦(для эритроцитов) ¦
L-------------+--------------+---------------+--------------------
13.1. Оперативный контроль воспроизводимости
Образцами для контроля могут быть пробы плазмы и эритроцитов
крови.
Объем отобранной для контроля пробы должен соответствовать
удвоенному объему, необходимому для проведения анализа по
методике. Минерализат, полученный после обработки пробы делят на
две равные части и анализируют в точном соответствии с прописью
методики, варьируя условия проведения анализа, т.е. получают два
результата в разных лабораториях или в одной, используя при этом
разные наборы мерной посуды, разные партии реактивов. Два
результата анализа не должны отличаться друг от друга на величину
допускаемых расхождений между результатами анализа.
(С - C ) <= Д,
1 2
где:
C - результат анализа рабочей пробы;
1
C - результат анализа этой же пробы, полученный другим
2
аналитиком с использованием другого набора мерной посуды и других
партий реактивов;
Д - допускаемые расхождения между результатами анализа одной и
той же пробы.
Норматив воспроизводимости вычисляют по формуле:
Д = Q (P )х сигма (ДЕЛЬТА),
m
где:
Q (P ) = 2,77, при m = 2, P = 0,95;
m
сигма (ДЕЛЬТА) - показатель воспроизводимости (характеристика
случайной составляющей погрешности, соответствующая содержанию
компонента в пробе).
Д = 2,77 (0,00021 + 0,0124 C); Д = 0,00058 + 0,034 C
При превышении норматива оперативного контроля
воспроизводимости эксперимент повторяют. При повторном превышении
указанного норматива Д выявляют причины, приводящие к
неудовлетворительным результатам контроля и устраняют их.
13.2. Оперативный контроль погрешности
Оперативный контроль погрешности выполняют в одной серии с КХА
рабочих проб. Образцами для контроля являются пробы плазмы и
эритроцитов. Минерализат, полученный после обработки делят на две
равные части, первую из которых анализируют в точном соответствии
с прописью методики, получают результат анализа исходной рабочей
пробы - C , вторую разбавляют в два раза и снова делят на две
1
равные части, первую из которых анализируют в точном соответствии
с прописью методики, получая результат анализа рабочей пробы,
разбавленной в два раза - С , а во вторую часть делают добавку
2
анализируемого компонента (x) и анализируют в точном соответствии
с прописью методики, получая результат анализа рабочей пробы,
разбавленной в два раза с добавкой - C .
3
Решение об удовлетворительной погрешности принимают при
выполнении условия:
(C - C - x) + (2 C - C ) <= K,
3 2 2 1
где:
C - результат анализа рабочей пробы;
1
C - результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза;
2
C - результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза,
3
с добавкой анализируемого компонента;
x - величина добавки анализируемого компонента;
K - норматив оперативного контроля погрешности.
K = 1,45 х 0,28 х C = 0,40 х C.
14. Нормы затрат времени на анализ
Для проведения анализа одной пробы на содержание селена
требуется 4 ч.
|
