Утверждаю
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации
Г.Г.ОНИЩЕНКО
29 июня 2003 года
Дата введения:
с момента утверждения
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ
КОНЦЕНТРАЦИЙ 3БЕТА-ХОЛЕСТ-5,7-ДИЕН-3-ОЛА БЕНЗОАТА
(БЕНЗОАТА-7-ДЕГИДРОХОЛЕСТЕРИНА) И 3БЕТА-ХОЛЕСТ-5-ЕН-3-ОЛА
БЕНЗОАТА (БЕНЗОАТА ХОЛЕСТЕРИНА) В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
МУК 4.1.1571-03
Методические указания подготовлены коллективом специалистов в
рамках Проблемной Комиссии "Научные основы гигиены труда и
профпатологии". Утверждены Первым заместителем Министра
здравоохранения Российской Федерации, Председателем Комиссии по
государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию,
Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации
Г.Г. Онищенко в июне 2003 г.
Методические указания по измерению концентраций вредных
веществ в воздухе рабочей зоны (сборник 37) разработаны с целью
обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных
веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и
ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) -
санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при
осуществлении санитарного контроля.
Методика контроля вредных веществ в воздухе рабочей зоны
разработана и подготовлена в соответствии с требованиями ГОСТ
12.1.005-88 ССБТ "Воздух рабочей зоны. Общие
санитарно-гигиенические требования".
Методика выполнена с использованием современных методов
исследования, метрологически аттестована и дает возможность
контролировать концентрации химических веществ на уровне и меньше
их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в ГН
2.2.5.686-98 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных
веществ в воздухе рабочей зоны" и ГН 2.2.5.687-98 "Ориентировочные
безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе
рабочей зоны".
Структурная формула не приводится.
C H O М. м. 488,76
34 48 2
Бензоат 7-дегидрохолестерин.
Структурная формула не приводится.
C H O
34 50 2 М. м. 490,78
Бензоат холестерина.
Бензоат 7-дегидрохолестерин - белый кристаллический порошок
без запаха и вкуса. Температура плавления - 134 -C. Растворим в
жирах и органических растворителях, нерастворим в воде.
В воздухе находится в виде аэрозоля.
Бензоат 7-дегидрохолестерин является малотоксичным веществом,
не обладает раздражающим действием на кожу и слизистые оболочки
глаз кроликов. Обладает специфическим влиянием на липидный обмен.
ПДК бензоата 7-дегидрохолестерина в воздухе - 1 мг/куб. м. 3
класс опасности.
Бензоат холестерина - белый кристаллический порошок без запаха
и вкуса. Температура плавления - 147 -C. Растворим в жирах и
органических растворителях, нерастворим в воде.
В воздухе находится в виде аэрозоля.
Бензоат холестерина является малотоксичным веществом, не
обладает раздражающим действием на кожу и слизистые оболочки глаз
кроликов. Специфическое влияние на липидный обмен менее выражено.
ПДК бензоата холестерина в воздухе - 4 мг/куб. м. 3 класс
опасности.
Характеристика метода
Определение основано на образовании окрашенного комплексного
соединения при взаимодействии холестерина с уксусным ангидридом и
серной кислотой в хлороформе с последующим фотометрическим
измерением продукта реакции при длине волны 675 нм.
Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.
Нижний предел измерения содержания бензоата
7-дегидрохолестерина в анализируемом объеме раствора - 40 мкг.
Нижний предел измерения бензоата 7-дегидрохолестерина в
воздухе - 0,5 мг/куб. м (при отборе 80 л воздуха).
Диапазон измеряемых концентраций бензоата 7-дегидрохолестерина
в воздухе от 0,5 до 10,0 мг/куб. м.
Определению не мешают: остаточные количества органических
растворителей; мешают: холестерин и бензоат холестерина.
Нижний предел измерения содержания бензоата холестерина в
анализируемом объеме раствора - 80 мкг.
Нижний предел измерения бензоата холестерина в воздухе - 2
мг/куб. м (при отборе 40 л воздуха).
Диапазон измеряемых концентраций бензоата холестерина в
воздухе от 2 до 20 мг/куб. м.
Определению не мешают: остаточные количества органических
растворителей; мешают: холестерин и бензоат 7-дегидрохолестерин.
Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 20%.
Приборы, аппаратура, посуда
Спектрофотометр Specord M-40, Carl Zess.
Весы аналитические ВЛА-200, ГОСТ 24104-88Е.
Аспирационное устройство, модель 822, ТУ 64-1-862-82.
Колбы мерные вместимостью 25, 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74Е.
Пипетки вместимостью 1, 2, 5 и 10 мл, ГОСТ 29227-91.
Пробирки колориметрические с пришлифованными пробками
вместимостью 10 мл, ГОСТ 25336-82Е.
Бюксы вместимостью 10 мл, ГОСТ 7148-70.
Роторный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.
Колбы грушевидные вместимостью 25 мл, ГОСТ 9737-70.
Воронки химические, ГОСТ 86-13-75.
Баня водяная лабораторная, МРТУ 64-186-23-68.
Стеклянные палочки.
Реактивы, растворы, материалы
Бензоат 7-дегидрохолестерин, СТП 0431-507-92.
Бензоат холестерина, содержание основного вещества не менее
99,0%.
Спирт этиловый, ректификат, ГОСТ 5963-67, 95% и в смеси с
хлороформом в соотношении 3:2.
Кислота серная, ГОСТ 4204-77, хч, 1 н раствор.
Хлороформ, ГОСТ 215-74, хч.
Уксусный ангидрид, ГОСТ 5815-77, ч.
Стандартный раствор N 1 бензоата 7-дегидрохолестерина
концентрацией 1000 мкг/мл готовят растворением 0,1400 г вещества в
смеси этанол - хлороформ (3:2) в мерной колбе вместимостью 100 мл.
Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.
Стандартный раствор N 2 с концентрацией бензоата
7-дегидрохолестерина 200 мкг/мл готовят соответствующим
разбавлением стандартного раствора N 1 смесью этанол - хлороформ
(3:2). Раствор устойчив в течение недели при хранении в
холодильнике.
Стандартный раствор N 1 бензоата холестерина концентрацией
1000 мкг/мл готовят растворением 0,1000 г вещества в смеси этанол
- хлороформ (3:2) в мерной колбе вместимостью 100 мл. Раствор
устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.
Стандартный раствор N 2 с концентрацией бензоата холестерина
200 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного
раствора N 1 смесью этанол - хлороформ (3:2). Раствор устойчив в
течение недели при хранении в холодильнике.
Фильтры АФА-ВП-10, ТУ 85-743-80.
Отбор проб воздуха
Воздух с объемным расходом 10 л/мин. аспирируют через фильтр
АФА-ВП-10. Для измерения 1/2 ПДК бензоата 7-дегидрохолестерина
следует отобрать 80 л воздуха, для измерения 1/2 ПДК бензоата
холестерина - 40 л воздуха.
Подготовка к измерению
Градуировочные растворы (устойчивы в течение 7 часов) готовят
согласно таблице.
Таблица
ШКАЛА ГРАДУИРОВОЧНЫХ РАСТВОРОВ
БЕНЗОАТА 7-ДЕГИДРОХОЛЕСТЕРИНА
-----------------------------------------------------------------¬
¦ N Стандартный Этанол - Содержание бензоата ¦
¦стандарта раствор N 2, хлороформ 7-дегидрохолестерина в ¦
¦ мл (3:2), мл градуировочном растворе, мкг¦
+----------------------------------------------------------------+
¦ 1 0,00 5,00 0 ¦
¦ 2 0,20 4,80 40 ¦
¦ 3 0,40 4,60 80 ¦
¦ 4 0,80 4,20 160 ¦
¦ 5 1,60 3,40 320 ¦
¦ 6 3,20 1,80 640 ¦
¦ 7 4,00 1,00 800 ¦
L-----------------------------------------------------------------
Таблица
ШКАЛА ГРАДУИРОВОЧНЫХ РАСТВОРОВ БЕНЗОАТА ХОЛЕСТЕРИНА
-----------------------------------------------------------------¬
¦ N Стандартный Этанол - Содержание бензоата ¦
¦стандарта раствор N 2, хлороформ холестерина в градуировочном¦
¦ мл (3:2), мл растворе, мкг ¦
+----------------------------------------------------------------+
¦ 1 0,00 5,00 0 ¦
¦ 2 0,40 4,60 80 ¦
¦ 3 0,80 4,20 160 ¦
¦ 4 1,20 3,80 240 ¦
¦ 5 1,60 3,40 320 ¦
¦ 6 3,20 1,80 640 ¦
¦ 7 4,00 1,00 800 ¦
L-----------------------------------------------------------------
Градуировочные растворы перемешивают, затем переносят в
грушевидные колбы и упаривают досуха под вакуумом при температуре
водяной бани 60 - 70 -C. Сухой остаток растворяют в 4 мл
хлороформа, добавляют по 1 мл уксусного ангидрида и 0,1 мл
концентрированной серной кислоты и перемешивают. Через 20 минут
после стояния пробирок в темном месте проводят фотометрирование.
Измеряют оптическую плотность полученных растворов при длине
волны 675 нм. Измерения проводят в кюветах с толщиной поглощающего
слоя 10 мм по отношению к контрольной пробе, не содержащей
определяемого вещества (раствор N 1 по таблице).
Строят градуировочный график: на ось ординат наносят значения
оптических плотностей градуировочных растворов, на ось абсцисс -
соответствующие им величины содержания вещества в градуировочном
растворе (мкг).
Проверка градуировочного графика проводится 1 раз в 3 месяца
или в случае использования новой партии реактивов.
Проведение измерения
Фильтр с отобранной пробой переносят в бюкс, заливают 5 мл
растворителя (смеси этанол - хлороформ в соотношении 3:2) и
оставляют на 15 минут, периодически помешивая стеклянной палочкой
для лучшего растворения вещества. Затем фильтр тщательно отжимают
и удаляют. Степень десорбции бензоата 7-дегидрохолестерина с
фильтра - 96%, а бензоата холестерина - 96,7%.
Раствор переносят в грушевидную колбу и упаривают досуха под
вакуумом при температуре водяной бани 60 - 70 -C. Сухой остаток
растворяют в 4 мл хлороформа, добавляют по 1 мл уксусного
ангидрида и 0,1 мл концентрированной серной кислоты и
перемешивают. Через 20 минут после стояния пробирок в темном месте
проводят фотометрирование. Оптическую плотность полученных
растворов пробы измеряют аналогично градуировочным растворам по
сравнению с контролем, который готовят одновременно и аналогично
пробе, используя чистый фильтр.
Количественное определение содержания веществ (в мкг) в
анализируемой пробе проводят по предварительно построенному
градуировочному графику.
Расчет концентрации
Концентрацию веществ "C" в воздухе (в мг/куб. м) вычисляют по
формуле:
a
C = -,
V
где:
a - содержание вещества в анализируемом объеме раствора пробы,
найденное по градуировочному графику, мкг;
V - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к
стандартным условиям, л (см. Приложение 1).
Приложение 1
Приведение объема воздуха к стандартным условиям проводят по
следующей формуле:
V x (273 + 20) x P
t
V = -------------------,
20 (273 + t) x 101,33
где:
V - объем воздуха, отобранный для анализа, л;
t
P - барометрическое давление, кПа (101,33 кПа = 760 мм рт.
ст.);
t - температура воздуха в месте отбора пробы, -C.
Для удобства расчета V следует пользоваться таблицей
20
коэффициентов (Приложение 2). Для приведения воздуха к стандартным
условиям надо умножить V на соответствующий коэффициент.
t
Приложение 2
КОЭФФИЦИЕНТЫ ДЛЯ ПРИВЕДЕНИЯ ОБЪЕМА ВОЗДУХА
К СТАНДАРТНЫМ УСЛОВИЯМ
-----T-------------------------------------------------------------------------¬
¦ -C ¦ Давление P, кПа/мм рт. ст. ¦
¦ +-------------------------------------------------------------------------+
¦ ¦97,33/ 97,86/ 98,4/ 98,93/ 99,46/ 100/ 100,53/ 101,06/ 101,33/ 101,86/¦
¦ ¦730 734 738 742 746 750 754 758 760 764 ¦
+----+-------------------------------------------------------------------------+
¦-30 ¦1,1582 1,1646 1,1709 1,1772 1,1836 1,1899 1,1963 1,2026 1,2058 1,2122 ¦
¦-26 ¦1,1393 1,1456 1,1519 1,1581 1,1644 1,1705 1,1768 1,1831 1,1862 1,1925 ¦
¦-22 ¦1,1212 1,1274 1,1336 1,1396 1,1458 1,1519 1,1581 1,1643 1,1673 1,1735 ¦
¦-18 ¦1,1036 1,1097 1,1158 1,1218 1,1278 1,1338 1,1399 1,1460 1,1490 1,1551 ¦
¦-14 ¦1,0866 1,0926 1,0986 1,1045 1,1105 1,1164 1,1224 1,1284 1,1313 1,1373 ¦
¦-10 ¦1,0701 1,0760 1,0819 1,0877 1,0986 1,0994 1,1053 1,1112 1,1141 1,1200 ¦
¦-6 ¦1,0540 1,0599 1,0657 1,0714 1,0772 1,0829 1,0887 1,0945 1,0974 1,1032 ¦
¦-2 ¦1,0385 1,0442 1,0499 1,0556 1,0613 1,0669 1,0726 1,0784 1,0812 1,0869 ¦
¦0 ¦1,0309 1,0366 1,0423 1,0477 1,0535 1,0591 1,0648 1,0705 1,0733 1,0789 ¦
¦+2 ¦1,0234 1,0291 1,0347 1,0402 1,0459 1,0514 1,0571 1,0627 1,0655 1,0712 ¦
¦+6 ¦1,0087 1,0143 1,0198 1,0253 1,0309 1,0363 1,0419 1,0475 1,0502 1,0557 ¦
¦+10 ¦0,9944 0,9999 0,0054 1,0108 1,0162 1,0216 1,0272 1,0326 1,0353 1,0407 ¦
¦+14 ¦0,9806 0,9860 0,9914 0,9967 1,0027 1,0074 1,0128 1,0183 1,0209 1,0263 ¦
¦+18 ¦0,9671 0,9725 0,9778 0,9830 0,9884 0,9936 0,9989 1,0043 1,0069 1,0122 ¦
¦+20 ¦0,9605 0,9658 0,9711 0,9783 0,9816 0,9868 0,9921 0,9974 1,0000 1,0053 ¦
¦+22 ¦0,9539 0,9592 0,9645 0,9696 0,9749 0,9800 0,9853 0,9906 0,9932 0,9985 ¦
¦+24 ¦0,9475 0,9527 0,9579 0,9631 0,9683 0,9735 0,9787 0,9839 0,9865 0,9917 ¦
¦+26 ¦0,9412 0,9464 0,9516 0,9566 0,9618 0,9669 0,9721 0,9773 0,9799 0,9851 ¦
¦+28 ¦0,9349 0,9401 0,9453 0,9503 0,9555 0,9605 0,9657 0,9708 0,9734 0,9785 ¦
¦+30 ¦0,9288 0,9339 0,9391 0,9440 0,9432 0,9542 0,9594 0,9645 0,9670 0,9723 ¦
¦+34 ¦0,9167 0,9218 0,9268 0,9318 0,9368 0,9418 0,9468 0,9519 0,9544 0,9595 ¦
¦+38 ¦0,9049 0,9099 0,9149 0,9199 0,9248 0,9297 0,9347 0,9397 0,9421 0,9471 ¦
L----+--------------------------------------------------------------------------
|
