Утверждаю
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации
Г.Г.ОНИЩЕНКО
29 июня 2003 года
Дата введения:
с момента утверждения
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ S-[2][(4-АМИНО-2-МЕТИЛ-5-
ПИРИМИДИНИЛ)МЕТИЛ[ФОРМИЛАМИНО]-1-[2-(ФОСФОНОКСИ)ЭТИЛ]-1-
ПРОПЕНИЛОВЫЙ ЭФИР ФЕНИЛКАРБОТИОНОВОЙ КИСЛОТЫ (БЕНФОТИАМИНА)
В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ
ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
МУК 4.1.1519-03
Методические указания подготовлены коллективом специалистов в
рамках Проблемной Комиссии "Научные основы гигиены труда и
профпатологии". Утверждены Первым заместителем Министра
здравоохранения Российской Федерации, Председателем Комиссии по
государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию,
Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации
Г.Г. Онищенко в июне 2003 г.
Методические указания по измерению концентраций вредных
веществ в воздухе рабочей зоны (сборник 37) разработаны с целью
обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных
веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и
ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) -
санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при
осуществлении санитарного контроля.
Методика контроля вредных веществ в воздухе рабочей зоны
разработана и подготовлена в соответствии с требованиями ГОСТ
12.1.005-88 ССБТ "Воздух рабочей зоны. Общие
санитарно-гигиенические требования".
Методика выполнена с использованием современных методов
исследования, метрологически аттестована и дает возможность
контролировать концентрации химических веществ на уровне и меньше
их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в ГН
2.2.5.686-98 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных
веществ в воздухе рабочей зоны" и ГН 2.2.5.687-98 "Ориентировочные
безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе
рабочей зоны".
Структурная формула не приводится.
C H N O SP
19 23 4 6
М. м. 466,5.
Бенфотиамин - белый кристаллический порошок со слабым запахом,
с температурой плавления 170 -C (с разложением). Плохо растворим в
воде, мало растворим в 95% спирте, растворим в 1% растворе натрия
гидроксида, ледяной уксусной кислоте, умеренно растворим в
метаноле.
В воздухе находится в виде аэрозоля и паров.
Бенфотиамин не обладает местнораздражающим действием на кожу,
однако проявляет слабое раздражающее действие на слизистые
оболочки глаз.
ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 0,1 мг/куб. м.
Характеристика метода
Методика основана на применении высокоэффективной жидкостной
хроматографии с применением УФ-детектора.
Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр и в 90%
метанол.
Нижний предел измерения в хроматографируемом объеме (10 мкл) -
0,025 мкг.
Нижний предел измерения в воздухе - 0,05 мг/куб. м (при отборе
50 л воздуха).
Диапазон измеряемых концентраций вещества в воздухе от 0,05 до
0,6 мг/куб. м.
Определение избирательно на стадиях сушки, просеивания,
хранения и фасовки вещества.
Определению не мешают остаточные количества растворителей.
Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 20%.
Время выполнения измерения, включая отбор проб, - 2 часа.
Приборы, аппаратура, посуда
Жидкостный хроматограф высокого давления "Милихром-1" или
другой модели с УФ-детектором.
Хроматографическая колонка размером 64 x 2 мм, заполненная
сорбентом "Силасорб С ".
18
Весы лабораторные ВЛА-200 2-го кл., ГОСТ 24104-88Е.
Аспирационное устройство, ГОСТ 17.2.6.01-86.
Фильтродержатели, ТУ 95-72-05-77.
Колбы мерные вместимостью 25, 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74Е.
Пипетки вместимостью 1, 2, 5 мл, ГОСТ 29227-91.
Пробирки колориметрические с пришлифованными пробками
вместимостью 10 мл, ГОСТ 25336-82Е.
Поглотительные приборы Рыхтера 7Р, ТУ 25-11-1081-75.
Воронки химические диаметром 30 мм, ГОСТ 25336-82Е.
Вакуумная установка или роторный испаритель ИР-1, ТУ
25-11-917-74.
Секундомер, ГОСТ 5072-97.
Линейка измерительная металлическая, ГОСТ 8309-75.
Лупа измерительная ЛИ-3-10Х, ГОСТ 8309-75.
pH-метр ЭВ-74.
Водяная баня, ТУ 64-1-2850-76.
Дистиллятор, ТУ 61-1-721-79.
Реактивы, растворы, материалы
Бенфотиамин, ФС 42-2379-85.
Метиловый спирт, ГОСТ 6995-77, 90% раствор.
Ортофосфорная кислота, ГОСТ 6552-80.
Элюент: к 100 мл 90% спирта метилового добавляют около 0,2 мл
ортофосфорной кислоты до pH 2,8.
Стандартный раствор N 1 с концентрацией 500 мкг/мл
бенфотиамина готовят растворением 0,0500 г вещества в 90% метаноле
в мерной колбе вместимостью 100 мл. Раствор устойчив в течение
двух недель при хранении в холодильнике.
Стандартный раствор N 2 с концентрацией 20 мкг/мл готовят
соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 90%
метанолом. Раствор устойчив в течение двух недель при хранении в
холодильнике.
Градуировочные растворы с концентрацией 0,5-1-2-3-4-6 мкг/мл
готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 2 90%
метанолом. Растворы применяют свежеприготовленными.
5 мл градуировочных стандартных растворов, что соответствует
2,5-5-10-15-20-30 мкг бенфотиамина, переносят в грушевидные колбы
и упаривают досуха под вакуумом при температуре 50 - 60 -C. Сухой
остаток растворяют в 1,0 мл элюента и хроматографируют.
Фильтр АФА-ХА-10, ТУ 95-743-80.
Отбор пробы воздуха
Воздух с объемным расходом 5 л/мин. аспирируют через фильтр
АФА-ХА-10 и поглотительный сосуд Рыхтера 7Р, содержащий 10 мл 90%
метанола. Поглотительный сосуд охлаждают смесью льда с хлористым
натрием. Для измерения 1/2 ОБУВ следует отобрать 50 л воздуха.
Пробы хранят в закрытых сосудах в течение суток в холодильнике.
Подготовка к измерению
Хроматографическая колонка промышленного изготовления.
Инжектируют в хроматограф от 0,025 до 0,3 мкг бенфотиамина из
градуировочных растворов при максимальном объеме вводимой пробы 10
мкл.
Условия хроматографирования градуировочных смесей и
анализируемых проб:
Температура термостата колонки 20 -C
Скорость подачи элюента 50 мкл/мин.
Чувствительность измерения детектора 1,6
Длина волны УФ-детектора 240 нм
Скорость движения диаграммной ленты 180 мм/мин.
Диапазон измерения самописца 100 мВ
Максимальный объем вводимой пробы 10 мкл
Время удерживания бенфотиамина 4 мин. 33 сек.
На основании полученных хроматограмм строят градуировочный
график, выражающий зависимость площади пиков (кв. мм) от
количества вещества в хроматографируемом объеме пробы (мкг).
Построение градуировочного графика необходимо проводить не
менее чем по 6 точкам, выполняя 5 параллельных измерений для
каждого раствора. Проверку градуировочного графика следует
проводить при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в
месяц.
Проведение измерения
Фильтр и содержимое поглотительного сосуда помещают в
колориметрическую пробирку с пришлифованной пробкой, доводят объем
до 10 мл 90% метанолом и оставляют при комнатной температуре на 15
минут, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего
растворения вещества. Затем фильтр тщательно отжимают и удаляют.
Степень десорбции вещества с фильтра - 96%. Полученный раствор
сливают в грушевидную колбу и упаривают досуха под вакуумом при
температуре 50 - 60 -C. Сухой остаток растворяют в 1,0 мл спирта
метилового 90%, подкисленного кислотой ортофосфорной до pH 2,8.
Параллельно с анализом проб проводят хроматографирование
раствора, полученного обработкой чистого фильтра.
Хроматографирование анализируемого раствора проводят в тех же
условиях по отношению к тому же элюенту, что и при построении
градуировочного графика.
Количественное содержание бенфотиамина (в мкг) в
хроматографируемом объеме проводят по предварительно построенному
градуировочному графику.
Расчет концентрации
Концентрацию бенфотиамина (C, мг/куб. м) в воздухе вычисляют
по формуле:
a x B
C = -----,
б x V
где:
a - количество вещества в хроматографируемом объеме пробы,
найденное по градуировочному графику, мкг;
б - хроматографируемый объем пробы, взятый для анализа, мл;
B - общий объем раствора пробы, мл;
V - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к
стандартным условиям, л (Приложение 1).
Методические указания разработаны ВНЦ БАВ, г. Москва.
Приложение 1
Приведение объема воздуха к стандартным условиям проводят по
следующей формуле:
V x (273 + 20) x P
t
V = -------------------,
20 (273 + t) x 101,33
где:
V - объем воздуха, отобранный для анализа, л;
t
P - барометрическое давление, кПа (101,33 кПа = 760 мм рт.
ст.);
t - температура воздуха в месте отбора пробы, -C.
Для удобства расчета V следует пользоваться таблицей
20
коэффициентов (Приложение 2). Для приведения воздуха к стандартным
условиям надо умножить V на соответствующий коэффициент.
t
Приложение 2
КОЭФФИЦИЕНТЫ ДЛЯ ПРИВЕДЕНИЯ ОБЪЕМА ВОЗДУХА
К СТАНДАРТНЫМ УСЛОВИЯМ
-----T-------------------------------------------------------------------------¬
¦ -C ¦ Давление P, кПа/мм рт. ст. ¦
¦ +-------------------------------------------------------------------------+
¦ ¦97,33/ 97,86/ 98,4/ 98,93/ 99,46/ 100/ 100,53/ 101,06/ 101,33/ 101,86/¦
¦ ¦730 734 738 742 746 750 754 758 760 764 ¦
+----+-------------------------------------------------------------------------+
¦-30 ¦1,1582 1,1646 1,1709 1,1772 1,1836 1,1899 1,1963 1,2026 1,2058 1,2122 ¦
¦-26 ¦1,1393 1,1456 1,1519 1,1581 1,1644 1,1705 1,1768 1,1831 1,1862 1,1925 ¦
¦-22 ¦1,1212 1,1274 1,1336 1,1396 1,1458 1,1519 1,1581 1,1643 1,1673 1,1735 ¦
¦-18 ¦1,1036 1,1097 1,1158 1,1218 1,1278 1,1338 1,1399 1,1460 1,1490 1,1551 ¦
¦-14 ¦1,0866 1,0926 1,0986 1,1045 1,1105 1,1164 1,1224 1,1284 1,1313 1,1373 ¦
¦-10 ¦1,0701 1,0760 1,0819 1,0877 1,0986 1,0994 1,1053 1,1112 1,1141 1,1200 ¦
¦-6 ¦1,0540 1,0599 1,0657 1,0714 1,0772 1,0829 1,0887 1,0945 1,0974 1,1032 ¦
¦-2 ¦1,0385 1,0442 1,0499 1,0556 1,0613 1,0669 1,0726 1,0784 1,0812 1,0869 ¦
¦0 ¦1,0309 1,0366 1,0423 1,0477 1,0535 1,0591 1,0648 1,0705 1,0733 1,0789 ¦
¦+2 ¦1,0234 1,0291 1,0347 1,0402 1,0459 1,0514 1,0571 1,0627 1,0655 1,0712 ¦
¦+6 ¦1,0087 1,0143 1,0198 1,0253 1,0309 1,0363 1,0419 1,0475 1,0502 1,0557 ¦
¦+10 ¦0,9944 0,9999 0,0054 1,0108 1,0162 1,0216 1,0272 1,0326 1,0353 1,0407 ¦
¦+14 ¦0,9806 0,9860 0,9914 0,9967 1,0027 1,0074 1,0128 1,0183 1,0209 1,0263 ¦
¦+18 ¦0,9671 0,9725 0,9778 0,9830 0,9884 0,9936 0,9989 1,0043 1,0069 1,0122 ¦
¦+20 ¦0,9605 0,9658 0,9711 0,9783 0,9816 0,9868 0,9921 0,9974 1,0000 1,0053 ¦
¦+22 ¦0,9539 0,9592 0,9645 0,9696 0,9749 0,9800 0,9853 0,9906 0,9932 0,9985 ¦
¦+24 ¦0,9475 0,9527 0,9579 0,9631 0,9683 0,9735 0,9787 0,9839 0,9865 0,9917 ¦
¦+26 ¦0,9412 0,9464 0,9516 0,9566 0,9618 0,9669 0,9721 0,9773 0,9799 0,9851 ¦
¦+28 ¦0,9349 0,9401 0,9453 0,9503 0,9555 0,9605 0,9657 0,9708 0,9734 0,9785 ¦
¦+30 ¦0,9288 0,9339 0,9391 0,9440 0,9432 0,9542 0,9594 0,9645 0,9670 0,9723 ¦
¦+34 ¦0,9167 0,9218 0,9268 0,9318 0,9368 0,9418 0,9468 0,9519 0,9544 0,9595 ¦
¦+38 ¦0,9049 0,9099 0,9149 0,9199 0,9248 0,9297 0,9347 0,9397 0,9421 0,9471 ¦
L----+--------------------------------------------------------------------------
|
