|
Стр. 4
(D - D1) х 0,005 х 100 х V3 х б
Х = -------------------------------- =
(D0 - D2) х а х V2 х 1000
(D - D1) х V3 х б
= --------------------------,
(D0 - D2) х a х V2 х 2000
где D - оптическая плотность испытуемого раствора; D1 - оптическая
плотность контрольного опыта на посторонние окрашенные вещества;
D0 - оптическая плотность раствора рабочего стандартного образца
кислоты никотиновой; D2 - оптическая плотность контрольного опыта
на реактивы; 0,005 - содержание кислоты никотиновой в 1 мл
раствора рабочего стандартного образца в миллиграммах; 100, V2 и
V3 - разведения в миллилитрах; а - навеска препарата в граммах или
количество таблеток, покрытых оболочкой; б - средняя масса одного
драже или одной таблетки, г; 1000 - пересчет в граммы.
Примечания. 1. Приготовление раствора рабочего стандартного
образца кислоты никотиновой: 0,5000 г кислоты никотиновой
растворяют в горячей воде в мерной колбе вместимостью 500 мл,
прибавляют 5 мл раствора серной кислоты (5 моль/л) и доводят объем
раствора водой до метки (основной раствор).
Раствор годен в течение 6 мес при хранении в банке оранжевого
стекла с притертой пробкой при температуре от 5 до 10 град. С.
0,5 мл основного раствора помещают в мерную колбу вместимостью
100 мл и доводят объем раствора водой до метки.
1 мл раствора рабочего стандартного образца содержит 0,005 мг
кислоты никотиновой. Раствор используют свежеприготовленный.
2. Приготовление раствора серной кислоты (5 моль/л): медленно
и осторожно, при постоянном перемешивании, вливают 30 мл
концентрированной серной кислоты в 102 мл воды.
3. Очистка метола: 100 г метола (ч. д. а. или ч.) смешивают с
0,7 г натрия бисульфита и вносят в кипящие 500 мл раствора серной
кислоты (0,05 моль/л). Если раствор сильно окрашен, к нему
прибавляют 10 г активированного угля.
Кипящий раствор быстро фильтруют через воронку Бюхнера,
которая предварительно нагрета горячей водой. Фильтрат переносят в
химический стакан вместимостью 1 л, прибавляют 0,3 г натрия
бисульфита, 0,7 л 95% спирта, перемешивают, помещают в холодильник
и оставляют на 18 ч. Выпавшие кристаллы отфильтровывают на воронке
Бюхнера, промывают 3 раза 95% спиртом и высушивают на воздухе в
темноте. Перекристаллизованный метол хранят в банке оранжевого
стекла с притертой пробкой в защищенном от света месте.
При изменении метола его следует повторно
перекристаллизовывать.
4. Приготовление раствора метола: перед употреблением готовят
8% раствор метола в растворе хлористоводородной кислоты (0,5
моль/л).
5. Приготовление роданобромидного раствора (проводят под
тягой): к 4 мл брома прибавляют 100 мл воды, энергично встряхивают
и отстоявшийся раствор декантируют.
К охлажденной на льду бромной воде (взятой в количестве,
нужном для анализа) прибавляют по каплям 10% раствор аммония
роданида или калия до светло - желтого окрашивания, затем
прибавляют 1% раствор аммония роданида до полного обесцвечивания и
небольшими порциями кальций углекислый до прекращения выделения
углекислого газа и образования осадка. Раствор фильтруют в банку
оранжевого стекла с притертой пробкой и хранят при температуре от
5 до 10 град. С.
Раствор годен в день приготовления.
8. Определение содержания никотинамида
Определение проводят одним из приведенных ниже методов.
1. Точную навеску порошка растертых драже или таблеток, или
соответствующее количество таблеток, покрытых оболочкой, растертых
в порошок, содержащих около 0,05 г никотинамида, количественно
переносят водой в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем
раствора водой до метки, перемешивают и фильтруют; первые 10 мл
отбрасывают, 10 мл полученного раствора помещают в мерную колбу
вместимостью 50 мл, прибавляют 25 мл раствора едкого кали (0,2
моль/л), доводят объем раствора водой до метки и перемешивают.
Полученный раствор помещают в электролитическую ячейку
полярографа, пропускают ток азота в течение 5 мин и
полярографируют, начиная с - 1,4 В.
Параллельно снимают полярограмму раствора рабочего
стандартного образца никотинамида.
Содержание С6Н6N2O (никотинамида) в одном драже или одной
таблетке в граммах (X) вычисляют по формуле:
H1 х 0,1 х 100 х 50 х б H1 х б
Х = ------------------------- = -------------,
Н0 х а х 10 х 1000 Н0 х а х 20
где Н1 - высота полярографической волны испытуемого раствора; Н0 -
высота полярографической волны раствора рабочего стандартного
образца никотинамида; 0,1 - содержание никотинамида в 1 мл
раствора рабочего стандартного образца никотинамида в
миллиграммах; 100, 50 и 10 - разведения в миллилитрах; а - навеска
препарата в граммах или количество таблеток, покрытых оболочкой; б
- средняя масса одного драже или одной таблетки в граммах; 1000 -
пересчет в граммы.
2. Точную навеску порошка растертых драже, таблеток или
количество таблеток, покрытых оболочкой, растертых в порошок,
указанных в соответствующих частных статьях, количественно
переносят водой в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем
раствора водой до метки, перемешивают и фильтруют; первые 10 мл
отбрасывают. Из полученного раствора готовят раствор второго
разведения с таким расчетом, чтобы содержание никотинамида в нем
составляло около 0,05 мг в 1 мл.
В две конические колбы вместимостью 25 мл помещают: в одну - 1
мл испытуемого раствора, во вторую - 1 мл раствора рабочего
стандартного образца никотинамида. В обе колбы прибавляют по 1 мл
воды, 1 мл раствора хлористоводородной кислоты (0,1 моль/л), 8 мл
свежеприготовленного раствора хлорамина Б, 1 мл 1% раствора
аммония роданида и оставляют на 10 мин. Затем прибавляют по 8 мл
95% спирта, 2 мл раствора калия фосфата однозамещенного (0,1
моль/л), 3 мл раствора натрия барбитурата и нагревают на водяной
бане при 60 град. С в течение 10 мин, быстро охлаждают до
комнатной температуры и измеряют оптическую плотность растворов
фиолетового цвета на спектрофотометре или фотоэлектроколориметре
при длине волны 555 нм в кюветах с толщиной слоя 10 мм. В качестве
раствора сравнения используют смесь 95% спирт - вода в соотношении
1:2.
Содержание С6Н6N2O (никотинамида) в одном драже или одной
таблетке в граммах (X) вычисляют по формуле:
D1 х 0,05 х 100 х V3 х б D 1 х V3 х б
Х = ------------------------- = -------------------,
D0 х а х V2 х 1000 D0 х а х V2 х 200
где D1 - оптическая плотность испытуемого раствора; Dо -
оптическая плотность раствора рабочего стандартного образца
никотинамида; 0,05 - содержание никотинамида в 1 мл раствора
рабочего стандартного образца в миллиграммах; 100, V2 и V3 -
разведения в миллилитрах; а - навеска препарата в граммах или
количество таблеток, покрытых оболочкой; б - средняя масса одного
драже или одной таблетки в граммах; 1000 - пересчет в граммы.
Примечания. 1. Приготовление раствора рабочего стандартного
образца никотинамида: 0,0500 г никотинамида растворяют в воде в
мерной колбе вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до
метки (основной раствор).
Раствор годен в течение 1 мес при хранении в банке оранжевого
стекла с притертой пробкой при температуре от 5 до 10 град. С.
Перед анализом полярографическим методом 10 мл основного
раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 25
мл раствора едкого кали (0,2 моль/л) и доводят объем раствора
водой до метки.
1 мл раствора рабочего стандартного образца содержит 0,1 мг
никотинамида.
Раствор годен в день приготовления.
Перед анализом колориметрическим методом 5 мл основного
раствора никотинамида переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл
и доводят объем раствора водой до метки.
1 мл раствора рабочего стандартного образца содержит 0,05 мг
никотинамида.
2. Приготовление раствора натрия барбитурата: 1 г барбитуровой
кислоты (ТУ 6-09-512-74 ч. д. а. или ч.) растворяют в 50 мл воды в
мерной колбе вместимостью 100 мл, прибавляют 11 мл раствора едкого
натра (0,5 моль/л), доводят объем раствора водой до метки,
перемешивают и фильтруют.
Раствор годен в день приготовления.
3. Хлорамин Б: свежеприготовленный 1% раствор перед
употреблением фильтруют.
9. Определение содержания
кислоты аскорбиновой (витамина С)
Точную навеску порошка растертых драже или таблеток или
соответствующее количество таблеток, покрытых оболочкой, растертых
в порошок, с содержанием около 0,1 г кислоты аскорбиновой
количественно переносят водой в мерную колбу вместимостью 100 мл,
доводят объем раствора водой до метки, перемешивают и фильтруют;
первые 10 мл отбрасывают. 10 мл полученного раствора помещают в
коническую колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 1 мл 2% раствора
хлористоводородной кислоты, 0,5 мл 1% раствора калия йодида, 2 мл
0,5% раствора крахмала, воды до общего объема 20 мл и титруют
раствором калия йодата (0,00167 моль/л) до появления стойкого
светло - синего окрашивания.
Параллельно проводят контрольный опыт. Для этого в коническую
колбу помещают 1 мл 2% раствора хлористоводородной кислоты, 0,5 мл
1% раствора калия йодида, 2 мл 0,5% раствора крахмала, воды до
общего объема 20 мл и титруют раствором калия йодата (0,00167
моль/л) до появления стойкого светлосинего окрашивания.
1 мл раствора калия йодата (0,00167 моль/л) соответствует
0,0008806 г С6Н8О6 (кислоты аскорбиновой).
10. Определение содержания рутина (витамина Р)
Точную навеску порошка растертых драже или таблеток, или
количество таблеток, покрытых оболочкой, растертых в порошок,
указанных в соответствующих частных статьях, взбалтывают с 40 мл
горячего метилового или горячего абсолютного спирта, охлаждают,
количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл,
доводят объем раствора сухим ацетоном до метки, перемешивают и
фильтруют; первые 10 мл отбрасывают. Из полученного раствора
готовят раствор второго разведения в сухом ацетоне так, чтобы
содержание в нем рутина было около 0,1 мг в 1 мл. К 2 мл
полученного раствора прибавляют 8 мл цитратно - борного реактива,
перемешивают и оставляют на 10 мин в защищенном от света месте.
Измеряют оптическую плотность полученного раствора
зеленовато - желтого цвета на спектрофотометре или
фотоэлектроколориметре при длине волны 420 нм в кювете с толщиной
слоя 10 мм.
В качестве раствора сравнения используют сухой ацетон.
Параллельно проводят определение с раствором Государственного
стандартного образца рутина. Для этого к 2 мл раствора
Государственного стандартного образца рутина прибавляют 8 мл
цитратно - борного реактива и далее поступают, как указано выше.
Содержание C27H30O16 х 3Н2О (рутина) в граммах (X) в одном
драже или одной таблетке вычисляют по формуле:
D1 х 0,1 х 100 х V3 х б D1 х V3 х б
Х = ------------------------- = ------------------- ,
D0 х а х V2 х 1000 D0 х а х V2 х 100
где D1 - оптическая плотность испытуемого раствора; Dо -
оптическая плотность раствора Государственного стандартного
образца рутина; 0,1 - содержание рутина в 1 мл раствора
Государственного образца в миллиграммах; 100, V2 и V3 - разведения
в миллилитрах; а - навеска препарата в граммах или количество
таблеток, покрытых оболочкой; б - средняя масса одного драже или
одной таблетки в граммах; 1000 - пересчет в граммы.
Примечания. 1. Приготовление раствора Государственного
стандартного образца рутина: 0,0250 г рутина, предварительно
высушенного при температуре 135 град. С до постоянной массы,
растворяют в 10 мл горячего метилового или горячего абсолютного
спирта, переносят в мерную колбу вместимостью 250 мл с помощью
сухого ацетона и доводят объем раствора тем же ацетоном до метки.
1 мл раствора Государственного стандартного образца содержит
0,1 мг рутина. Раствор годен в течение 6 мес при хранении в хорошо
укупоренной банке оранжевого стекла при температуре от 5 до 10
град. С.
2. Приготовление цитратно - борного реактива: к 10 г лимонной
кислоты, высушенной при температуре 60 град. С в течение 2 ч,
прибавляют 10 мл сухого ацетона (раствора А).
К 0,8 г борной кислоты прибавляют 100 мл сухого ацетона
(раствор Б). Оба раствора пересыщены, и перед употреблением их
фильтруют.
Непосредственно перед употреблением смешивают 4 мл раствора А
и 4 мл раствора Б.
11. Определение альфа - токоферола ацетата (витамина Е)
Точную навеску порошка растертых драже (не более 1 г) или 2
таблетки, растертые в порошок, количественно переносят 10
миллилитрами воды в коническую колбу вместимостью 100 мл и
нагревают на водяной бане при температуре от 60 до 70 град. С при
перемешивании в течение 5 мин. Затем прибавляют 30 мл 95% спирта,
3 мл 50% раствора едкого кали и нагревают в течение 30 мин на
водяной бане с обратным холодильником при температуре кипения
смеси. Содержимое колбы охлаждают до комнатной температуры,
количественно переносят 50 мл воды в делительную воронку и
извлекают 150 мл эфира для наркоза в течение 2 мин. В случае
образования эмульсии проводят дополнительное извлечение эфиром 3
раза по 25 мл. Объединенные эфирные извлечения промывают порциями
по 50 мл до исчезновения щелочной реакции промывных вод (проба с
фенолфталеином). Промытые эфирные извлечения медленно фильтруют в
колбу для отгона через бумажный фильтр, на который помещено около
8 г безводного натрия сульфата, фильтр с натрия сульфатом
промывают 3 раза эфиром порциями по 10 мл, который фильтруют в ту
же колбу. Эфир отгоняют в токе азота или под вакуумом на водяной
бане, нагретой не выше 40 град. С.
Остаток тотчас же растворяют в абсолютном спирте до получения
концентрации около 60 мкг в 1 мл (раствор А).
15 мл раствора А переносят в колбу для гидрирования
вместимостью 50 мл, прибавляют около 0,2 г палладиевого
катализатора, перемешивают и гидрируют в течение 15 мин в приборе,
изображенном на рис. 5 (см. определение ретинола ацетата и
ретинола пальмитата). По окончании гидрирования в колбу прибавляют
около 0,3 г силикагеля марки КСМ или ШСМ, перемешивают и
фильтруют; 2 мл полученного раствора переносят в мерную колбу
вместимостью 25 мл, прибавляют 15 мл абсолютного спирта, 1 мл 0,5%
спиртового раствора о - фенантролина, 1 мл 0,2% спиртового
раствора железа окисного хлорида, доводят объем раствора тем же
спиртом до метки, перемешивают и оставляют в защищенном от света
месте.
Точно через 10 мин после прибавления раствора железа окисного
хлорида измеряют оптическую плотность раствора
красновато - оранжевого цвета на спектрофотометре при длине волны
520 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.
В качестве раствора сравнения используют абсолютный спирт.
Параллельно проводят контрольный опыт на реактивы. Из величины
оптической плотности испытуемого раствора вычитают величину
оптической плотности контрольного опыта.
Содержание альфа - токоферола ацетата в микрограммах в 1 мл
находят по калибровочному графику.
Содержание C31H52O3 (альфа - токоферола ацетата) в одной
таблетке или драже в граммах (X) вычисляют по формуле:
С х V х б С х V х б
Х = --------------------- = ---------------,
а х 2 х 1000 х 1000 а х 2000000
где С - содержание альфа - токоферола в 25 мл, найденное по
калибровочному графику, в микрограммах; V и 2 - разведения в
миллилитрах; а - навеска препарата в граммах или количество
таблеток, покрытых оболочкой; б - средняя масса одного драже в
граммах; 1000, 1000 - пересчет в граммы.
Примечания. 1. Построение калибровочного графика: 0,1000 г
Государственного стандартного образца альфа - токоферола ацетата
растворяют в 30 мл абсолютного спирта, прибавляют 3 мл 50%
раствора едкого кали и нагревают в течение 30 мин на водяной бане
с обратным холодильником при температуре кипения смеси. Извлекают
неомыляемый остаток эфиров для наркоза, как указано выше, эфир
отгоняют на водяной бане в токе азота.
Остаток растворяют в абсолютном спирте, переносят в мерную
колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора тем же спиртом
до метки и перемешивают.
1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью
25 мл, доводят объем раствора тем же спиртом до метки и
перемешивают.
Из полученного раствора отбирают 1, 2, 3, 4, 5 мл раствора в
мерные колбы вместимостью 25 мл и проводят реакцию с растворами
о-фенантролина и железа окисного хлорида, как указано выше.
Точно через 10 мин после прибавления раствора железа окисного
хлорида измеряют оптическую плотность растворов от оранжевого до
красновато - оранжевого цвета на спектрофотометре при длине волны
520 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, как указано выше.
Из величин оптической плотности растворов Государственного
стандартного образца вычитают величину оптической плотности
контрольного опыта на реактивы. Строят калибровочный график,
откладывая по оси абсцисс количества альфа - токоферола ацетата в
микрограммах в 25 мл раствора, а по оси ординат - соответствующие
им оптические плотности.
2. Приготовление реактивов: 0,5% раствор о-фенантролина и 0,2%
раствор железа окисного хлорида готовят на абсолютном спирте.
Растворы годны в течение 1 мес при хранении в банках оранжевого
стекла с притертыми пробками при комнатной температуре.
12. Определение кальция пантотената
Определение содержания кальция пантотената проводят
микробиологическим методом с Saccharomycodes ludwigii KM в
качестве тест - микроорганизма.
Точную навеску порошка растертых драже, таблеток или таблеток,
покрытых оболочкой, растертых в порошок, указанных в
соответствующих частных статьях, помещают в мерную колбу
определенной вместимости, прибавляют небольшое количество воды,
взбалтывают, доводят объем раствора водой до метки и фильтруют
(основной раствор). Из полученного основного раствора готовят
последовательно разведения с таким расчетом, чтобы содержание в
нем кальция пантотената было около 0,01 мкг в 1 мл.
Готовят растворы рабочих стандартных и испытуемых образцов в
конических колбах вместимостью 50 мл по следующей схеме.
----------T-----------------------------T------------T-----------¬
¦ N колбы ¦ Количество рабочего ¦ Количество ¦Количество ¦
¦ ¦раствора кальция пантотената ¦ воды, мл ¦ основной ¦
¦ ¦(0,01 мкг/мл) или испытуемого¦ ¦ cреды, мл ¦
¦ ¦ образца, мл ¦ ¦ ¦
+---------+-----------------------------+------------+-----------+
¦ 1 ¦ 0 ¦ 5,0 ¦ 5,0 ¦
¦ 2 ¦ 0,5 ¦ 4,5 ¦ 5,0 ¦
¦ 3 ¦ 1,0 ¦ 4,0 ¦ 5,0 ¦
¦ 4 ¦ 1,5 ¦ 3,5 ¦ 5,0 ¦
¦ 5 ¦ 2,0 ¦ 3,0 ¦ 5,0 ¦
¦ 6 ¦ 3,0 ¦ 2,0 ¦ 5,0 ¦
¦ 7 ¦ 4,0 ¦ 1,0 ¦ 5,0 ¦
L---------+-----------------------------+------------+------------
Общий объем растворов в колбах 10 мл.
Определение проводят не менее двух раз. Колбы закрывают
ватными пробками и стерилизуют насыщенным водяным паром в паровом
стерилизаторе при 1 ати (0,1 МПа) 15 мин. После охлаждения в
каждую колбу вносят по 2 капли разведенной взвеси тест - культуры.
Засеянные колбы инкубируют при температуре от 29 до 30 град. С
48-72 ч. Для прекращения роста дрожжевой культуры все колбы
подвергают обработке текучим паром в течение 5 мин. После этого
колбы охлаждают и интенсивность роста тест - культуры в колбах с
растворами рабочего стандартного и испытуемого образцов измеряют
на фотоэлектроколориметре - нефелометре при длине волны около 540
нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.
Содержание С18Н32СаN2О10 (кальция пантотената) в одном драже
или одной таблетке в граммах (X) вычисляют по формуле:
С х б х К
Х = -------------,
а х 1 000 000
где С - среднеарифметическое содержание кальция пантотената,
найденное по стандартной кривой из 6 возрастающих концентраций
растворов испытуемого образца, в микрограммах; К - коэффициент
разведения; а - навеска препарата в граммах или количество
таблеток, покрытых оболочкой; б - средняя масса одного драже в
граммах; 1 000 000 - пересчет в граммы.
Примечания. 1. Приготовление раствора рабочего стандартного
образца кальция пантотената: 0,0500 г кальция пантотената в
пересчете на 100% вещество по содержанию азота растворяют в 25%
спирте в мерной колбе вместимостью 50 мл и доводят объем раствора
тем же спиртом до метки (основной раствор).
1 мл основного раствора содержит 1 мг кальция пантотената.
Раствор годен в течение 2 мес при хранении в банке с притертой
пробкой при 4-6 град. С.
1 мл основного раствора помещают в мерную колбу вместимостью
100 мл и доводят объем раствора водой до метки. 10 мл полученного
раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят
объем раствора водой до метки. 1 мл полученного раствора помещают
в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой
до метки (рабочий раствор).
Рабочий раствор содержит 0,01 мкг кальция пантотената в 1 мл.
2. Построение стандартной кривой: на оси абсцисс откладывают
содержание кальция пантотената в колбах стандартного ряда, а на
оси ординат - соответствующие им значения процента
светопропускания. По полученным точкам строят стандартную кривую.
3. Поддержание тест - культуры: S. ludwigii KM поддерживают на
скошенном сусло - агаре, приготовленном из солодового сусла,
доведенного до 7 град. Б (Баллинга) с помощью сахарометра, с
добавлением 1,5% агара микробиологического. Инкубацию ведут при
температуре от 29 до 30 град. С в течение 48 ч. Тест - культуру
хранят при температуре от 4 до 6 град. С, пересевают не реже
одного раза в месяц.
4. Приготовление основной среды. Состав среды:
сахарозы 40 г
аммония сульфата (х.ч.) 6 г
магния сульфата (х.ч.) 1,4 г
натрия хлорида (х.ч.) 1 г
калия фосфата однозамещенного (х.ч.) 2 г
калия фосфата двузамещенного (х.ч.) 0,2 г
тиамина хлорида 0,002 г
кислоты никотиновой 0,002 г
пиридоксина гидрохлорида 0,0002 г
биотина (ТУ 64-5-94-84 ч.д.а. или ч.) 0,000002 г
воды до 1 л
рН среды до стерилизации 5,5-5,7 (потенциометрически).
Сахарозу предварительно обрабатывают углем активированным
осветляющим. Для этого к 100 мл 20% раствора сахарозы прибавляют 5
г угля, встряхивают в течение 40 мин и фильтруют через бумажный
фильтр.
5. Приготовление посевного материала: небольшое количество
48-часовой культуры S. ludwigii KM переносят петлей в 10 мл среды,
состоящей из 5 мл основной среды и 5 мл воды. Инкубацию ведут в
течение 2 сут. Затем от 0,2 до 0,5 мл этой суспензии переносят в
15 мл раствора натрия хлорида изотонического 0,9%; мутность
используемой суспензии для засева должна быть 96-98% по шкале
светопропускания фотоэлектроколориметра - нефелометра при длине
волны около 540 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.
СТАНДАРТНЫЕ ОБРАЗЦЫ
Стандартные образцы - это вещества, с которыми проводят
сравнение испытуемых лекарственных средств при проведении их
анализа с использованием физико - химических и биологических
методов.
Стандартные образцы условно разделяют на химические и
биологические. Один и тот же образец в соответствии с указаниями
частной статьи может использоваться и для физико - химических, и
для биологических анализов.
Стандартные образцы подразделяются на Государственные
стандартные образцы (ГСО), рабочие стандартные образцы (РСО) и
стандартные образцы веществ - свидетелей (СОВС).
Выпуск Государственных стандартных образцов осуществляют в
соответствии с фармакопейной статьей. Фармакопейная статья на ГСО
разрабатывается и пересматривается предприятиями (организациями),
выпускающими или разрабатывающими лекарственные средства,
согласовывается с Государственным научно - исследовательским
институтом по стандартизации и контролю лекарственных средств
(ГНИИСКЛС) и утверждается в установленном порядке. Аттестацию
каждой серии ГСО в соответствии с требованиями фармакопейной
статьи осуществляет ГНИИСКЛС. На этикетке ГСО указывают его
активность или процентное содержание, при отсутствии этого
указания стандартный образец принимают за 100%.
В качестве рабочих стандартных образцов используют образцы
серийных лекарственных веществ, соответствующие требованиям
фармакопейной статьи. При расчете количественного содержания
определяемого вещества в лекарственной форме учитывают фактическое
содержание данного вещества в РСО.
РСО, предназначенные для проведения анализа лекарственных
средств с использованием биологических методов, аттестуют в
ГНИИСКЛС.
Стандартные образцы веществ - свидетелей используют для
определения примесей или компонентного состава лекарственных
средств. В качестве СОВС могут быть использованы ГСО, РСО, а также
вещества, специально изготовленные и аттестованные в порядке,
предусмотренном частной фармакопейной статьей.
Нормативно - техническую документацию на ГСО необходимо
разрабатывать с учетом требований к соответствующему
Международному стандартному образцу ВОЗ.
Настоящая статья не распространяется на стандартные образцы
медицинских иммунобиологических препаратов, а также на стандартные
образцы радиофармацевтических препаратов.
ТИТРОВАННЫЕ РАСТВОРЫ
Общие замечания
Титрованными растворами называются растворы точно известной
концентрации, предназначенные для целей объемного анализа.
Концентрация титрованного раствора (титранта) обычно
выражается его молярностью, титром или титром по определенному
веществу.
Молярность - это выраженное в молях количество растворенного
вещества, содержащееся в одном литре раствора. Молярность
вычисляется как отношение количества растворенного вещества к
объему раствора (размерность - моль/л).
Титр - это выраженная в граммах масса растворенного вещества,
содержащаяся в одном миллилитре раствора. Титр вычисляют как
отношение массы растворенного вещества к объему раствора
(размерность - г/мл).
Титр титранта по определяемому веществу - это выраженная в
граммах масса определяемого вещества, эквивалентная одному
миллилитру данного титранта. Титр по определяемому веществу
вычисляют, исходя из молярности или титра титранта с учетом
стехиометрических коэффициентов уравнения химической реакции,
протекающей при титровании, и молярных масс реагирующих веществ
(размерность - г/мл).
Примечание. Моль представляет собой количество вещества,
содержащее столько специфицированных структурных единиц, сколько
атомов содержится в 0,012 кг (12 г) изотопа углерода-12, т. е.
23
один моль содержит 6,022 х 10 (число Авогадро) специфицированных
структурных единиц вещества. В качестве специфицированных
структурных единиц могут быть выбраны элементарные частицы, а
также ионы, атомы, молекулы или их доли. В аналитической химии
величину этих долей выбирают так, чтобы каждая из них была
ответственна за передачу электрона или перенос одной единицы
заряда соответственно при протекании окислительно -
восстановительных или объемных реакций, лежащих в основе данного
аналитического метода. Для обозначения такой доли иона, атома или
молекулы принят термин "условная частица" (УЧ).
В качестве единицы измерения массы специфицированных
структурных единиц и в том числе условных частиц используют
23
атомную единицу массы (углеродную единицу). 6,022 х 10 атомных
единиц массы составляют один грамм, следовательно, масса одного
моля вещества, выраженная в граммах, численно равна массе
выбранной специфицированной структурной единицы, выраженной в
атомных единицах массы (углеродных единицах).
Для приготовления титрованных растворов применяют химически
чистые вещества. Навеску такого вещества растворяют в определенном
объеме свежепрокипяченной и охлажденной дистиллированной воды или
другого растворителя и тщательно перемешивают.
Титрованные растворы можно готовить, пользуясь
соответствующими фиксаналами.
Если вещество нельзя получить в достаточно чистом виде или его
концентрация изменяется при хранении раствора, то готовят раствор
приблизительной концентрации, несколько большей, чем необходимо по
расчету.
Титр полученного раствора устанавливают по стандартному
титрованному раствору (фиксаналу) или по точной навеске другого
химически чистого вещества, устойчивого при хранении.
При установке титра титруемый раствор берут пипеткой и
обязательно проводят контрольный опыт.
Концентрацию раствора вычисляют одним из указанных ниже
способов.
Первый способ - по навеске химически чистого вещества.
Молярность (М, моль/л) вычисляют по следующей формуле:
а х 1000
М = ----------,
Э х V
где а - навеска химически чистого вещества в граммах; Э - молярная
масса условных частиц химически чистого вещества в граммах на
моль; V - объем раствора, пошедшего на титрование навески, в
миллилитрах; 1000 - количество миллилитров в 1 л раствора.
Второй способ - по титрованному раствору известной
концентрации.
Молярность (М, моль/л) вычисляют по следующей формуле:
М0 х V0
М = ----------,
V
где М0 - молярность раствора вещества, по которому устанавливается
титр, моль/л; V0 - объем раствора, по которому устанавливается
титр, в миллилитрах; V - объем раствора, молярность которого
устанавливают, в миллилитрах.
Для приготовленных титрованных растворов вычисляют поправочный
коэффициент к молярности (К), представляющий собой отношение
реально полученной концентрации титрованного раствора к
теоретически заданной. Коэффициент К должен находиться в пределах
от 0,98 до 1,02. При отклонении величины К от указанных пределов
растворы необходимо соответственно укрепить или разбавить.
В описании каждого титрованного раствора указывается
теоретическое содержание химически чистого вещества в 1 мл
раствора.
Титрованные растворы хранят при комнатной температуре, защищая
их при необходимости от воздействия углекислоты и влаги воздуха и
от прямых солнечных лучей.
Раствор аммония роданида (0,1 моль/л)
NH4SCN М. м. 76,12
1 мл раствора содержит 0,007612 г аммония роданида.
Приготовление. 7,7 г аммония роданида растворяют в воде в
мерной колбе вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до
метки.
Установка титра. К 25 мл раствора серебра нитрата (0,1 моль/л)
прибавляют 50 мл воды, 2 мл азотной кислоты, 2 мл раствора
железоаммониевых квасцов и титруют приготовленным раствором
аммония роданида до желто - розового окрашивания раствора.
Молярность раствора вычисляют по второму способу.
Раствор кали едкого спиртовой (0,5 моль/л)
КОН М. м. 56,11
1 мл раствора содержит 0,02806 г калия гидроокиси.
Приготовление. 33 г кали едкого растворяют в 20 мл воды в
мерной колбе вместимостью 1 л и доводят объем раствора очищенным
спиртом до 1 л. Раствор оставляют на 24 ч. Сливают прозрачную
жидкость с осадка в стеклянный сосуд с хорошо подобранной
резиновой пробкой.
Примечание. Получение очищенного спирта: смесь в соотношении 1
л 95 % спирта и 10 г кали едкого кипятят с обратным холодильником
в течение 30 мин и затем спирт отгоняют.
Установка титра. 25 мл раствора хлористоводородной кислоты
(0,5 моль/л) титруют приготовленным раствором кали едкого до
слабо - розового окрашивания (индикатор - фенолфталеин).
Молярность раствора вычисляют по второму способу.
Титр раствора устанавливают каждый раз перед применением.
Хранить в склянках с резиновыми пробками в защищенном от света
месте.
Раствор кали едкого спиртовой (0,1 моль/л)
1 мл раствора содержит 0,005611 г калия гидроокиси.
Приготовление. 200 мл раствора кали едкого спиртового (0,5
моль/л) помещают в мерную колбу вместимостью 1 л и доводят объем
раствора очищенным спиртом до метки.
Установка титра. 25 мл раствора хлористоводородной кислоты
(0,1 моль/л) титруют приготовленным раствором кали едкого до
слабо - розового окрашивания (индикатор - фенолфталеин).
Молярность раствора вычисляют по второму способу.
Титр раствора устанавливают каждый раз перед применением.
Хранить в стеклянных сосудах с резиновыми пробками в
защищенном от света месте.
Раствор кали едкого водно - спиртовой (1 моль/л)
1 мл раствора содержит 0,05611 г калия гидроокиси.
Приготовление. 66 г кали едкого растворяют в 450 мл воды в
мерной колбе вместимостью 1 л и доводят объем раствора очищенным
спиртом до метки. Раствор оставляют на 24 ч. Сливают прозрачную
жидкость с осадка в стеклянный сосуд с хорошо подобранной
резиновой пробкой.
Установка титра. 25 мл раствора хлористоводородной кислоты (1
моль/л) титруют приготовленным раствором кали едкого до
слабо - розового окрашивания (индикатор - фенолфталеин).
Молярность раствора вычисляют по второму способу.
Титр раствора устанавливают каждый раз перед применением.
Хранить в стеклянных сосудах с резиновыми пробками в
защищенном от света месте.
Раствор кали едкого
водно - спиртовой (0,05 моль/л)
1 мл раствора содержит 0,002806 г калия гидроокиси.
Приготовление. 100 мл раствора кали едкого спиртового (0,5
моль/л) помещают в мерную колбу вместимостью 1 л, прибавляют 400
мл воды и доводят объем раствора очищенным спиртом до метки.
Установка титра. 25 мл раствора хлористоводородной кислоты
(0,05 моль/л) титруют приготовленным раствором кали едкого до
слабо - розового окрашивания (индикатор - фенолфталеин).
Молярность раствора вычисляют по второму способу.
Раствор применяют свежеприготовленным.
Раствор натра едкого (1 моль/л)
NaOH M. м. 40,00
1 мл раствора содержит 0,0400 г натрия гидроокиси.
Приготовление исходного раствора. 160 г натра едкого
растворяют в 300 мл воды, сосуд плотно закрывают резиновой пробкой
и оставляют до следующего дня. Прозрачную жидкость сливают с
осадка и используют для приготовления растворов натра едкого.
Хранить в стеклянных банках, плотно укупоренных резиновыми
пробками.
Приготовление раствора натра едкого (1 моль/л). 80 мл
исходного раствора натра едкого помещают в мерную колбу
вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки.
Проверка на содержание карбонатов. 45 мл раствора
хлористоводородной кислоты (1 моль/л) титруют приготовленным
раствором натра едкого (индикатор - фенолфталеин). К
оттитрованному раствору прибавляют по каплям раствор
хлористоводородной кислоты (1 моль/л) до исчезновения розового
окрашивания и кипятят до уменьшения объема (около 20 мл). В
процессе кипения при возникновении розового окрашивания прибавляют
раствор хлористоводородной кислоты (1 моль/л) до обесцвечивания.
Раствор охлаждают и в случае наличия розовой окраски прибавляют
раствор хлористоводородной кислоты до обесцвечивания. Суммарное
количество прибавленного раствора хлористоводородной кислоты не
должно превышать 0,1 мл.
Установка титра. Около 5 г (точная навеска) калия
гидрофталата, предварительно тонко измельченного и высушенного при
температуре 120 град. С в течение 2 ч, растворяют в 75 мл воды и
титруют приготовленным раствором натра едкого (индикатор -
фенолфталеин). Молярность раствора вычисляют по первому способу.
Титр раствора устанавливают каждый раз перед применением.
Хранить в стеклянных сосудах, плотно укупоренных резиновыми
пробками.
Стеклянные сосуды, соединенные с бюретками, предохраняют
трубками с натронной известью.
Раствор натра едкого (0,5 моль/л)
1 мл раствора содержит 0,0200 г натрия гидроокиси.
Приготовление. 40 мл исходного раствора натра едкого помещают
в мерную колбу вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до
метки.
Проверка на содержание карбонатов. Проводят, как описано при
приготовлении раствора натра едкого (1 моль/л). Для определения
берут 45 мл раствора хлористоводородной кислоты (0,5 моль/л).
Установка титра. Около 2,5 г (точная навеска) калия
гидрофталата, предварительно тонко измельченного и высушенного при
температуре 120 град. С в течение 2 ч, растворяют в 50 мл воды и
далее поступают так же, как при установке титра раствора натра
едкого (1 моль/л).
Раствор натра едкого (0,1 моль/л)
1 мл раствора содержит 0,0040 г натрия гидроокиси.
Приготовление. 8 мл исходного раствора натра едкого помещают в
мерную колбу вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до
метки.
Проверка на содержание карбонатов. Проводят, как описано при
приготовлении раствора натра едкого (1 моль/л). Для определения
берут 45 мл раствора хлористоводородной кислоты (0,1 моль/л).
Установка титра. Около 0,5 г (точная навеска) калия
гидрофталата, предварительно тонко измельченного и высушенного при
температуре 120 град. С в течение 2 ч, растворяют в 30 мл воды и
далее поступают так же, как при установке титра раствора натра
едкого (1 моль/л).
Раствор натра едкого (0,05 моль/л)
1 мл раствора содержит 0,0020 г натрия гидроокиси.
Приготовление. 4 мл исходного раствора натра едкого помещают в
мерную колбу вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до
метки.
Проверка на содержание карбонатов. Проводят, как описано при
приготовлении раствора натра едкого (1 моль/л). Для определения
берут 45 мл раствора хлористоводородной кислоты (0,05 моль/л).
Установка титра. Около 0,25 г (точная навеска) калия
гидрофталата, предварительно тонко измельченного и высушенного при
температуре 120 град. С в течение 2 ч, растворяют в 30 мл воды и
далее поступают так же, как при установке титра раствора натра
едкого (1 моль/л).
Раствор в запас не готовят.
Раствор натра едкого (0,02 моль/л)
1 мл раствора содержит 0,0008 г натрия гидроокиси.
Приготовление. 1,6 мл исходного раствора натра едкого помещают
в мерную колбу вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до
метки.
Проверка на содержание карбонатов. Проводят, как описано при
приготовлении раствора натра едкого (1 моль/л). Для определения
берут 45 мл раствора хлористоводородной кислоты (0,02 моль/л).
Установка титра. Около 0,1 г (точная навеска) калия
гидрофталата, предварительно тонко измельченного и высушенного при
температуре 120 град. С в течение 2 ч, растворяют в 30 мл воды и
далее поступают так же, как при установке титра раствора натра
едкого (1 моль/л).
Раствор в запас не готовят.
Раствор натра едкого (0,01 моль/л)
1 мл раствора содержит 0,0004 г натрия гидроокиси.
Приготовление. 0,8 мл исходного раствора натра едкого помещают
в мерную колбу вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до
метки.
Проверка на содержание карбонатов. Проводят как описано при
приготовлении раствора натра едкого (1 моль/л). Для определения
берут 45 мл раствора хлористоводородной кислоты (0,01 моль/л).
Установка титра. Около 0,05 г (точная навеска) калия
гидрофталата, предварительно тонко измельченного и высушенного при
температуре 120 град. С в течение 2 ч, растворяют в 30 мл воды и
далее поступают так же, как при установке титра раствора натра
едкого (1 моль/л).
Раствор в запас не готовят.
Раствор натра едкого в смеси
метилового спирта и бензола (0,1 моль/л)
1 мл раствора содержит 0,0040 г натрия гидроокиси.
Приготовление. 4,2 г натра едкого растворяют в 100 мл
метилового спирта в мерной колбе вместимостью 1 л. Объем раствора
доводят бензолом и метиловым спиртом до метки, прибавляя их
попеременно при помешивании. Соотношение метилового спирта и
|
